【摘 要】
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微丝结合蛋白villin(VLN)属于凝溶胶蛋白超家族的一员,微丝的动态变化与植物根毛细胞的生长发育有密切关系。微丝解聚会引起根毛长度增加,还会引起根毛的膨胀。微丝不仅可以调
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微丝结合蛋白villin(VLN)属于凝溶胶蛋白超家族的一员,微丝的动态变化与植物根毛细胞的生长发育有密切关系。微丝解聚会引起根毛长度增加,还会引起根毛的膨胀。微丝不仅可以调节根毛的长度,还参与维持根毛细胞的极性。也就是说,微丝对根毛细胞的生长起到重要作用,目前已经有一些微丝结合蛋白参与了根毛细胞的生长,但是仍有一些调节根毛细胞生长的分子机制尚未揭示。AtVLN1作为拟南芥VLN家族中的一员,AtVLN1主要调控微丝的成束过程。目前尚未有AtVLN1体内功能的研究,所以本实验对AtVLN1对不同器官组织细胞生长功能进行鉴定。本实验以拟南芥野生型、两突变体(Atvln1-1和Atvln1-2)和AtVLN1恢复突变(AtVLN1-COM)为实验材料,通过AtVLN1启动子的克隆及GUS表达载体构建,成功筛选出PAtVLN1-GUS纯合植株。AtVLN1恢复突变载体构建及转基因植株筛选,成功筛选出AtVLN1-COM纯合植株。AtVLN1在不同组织定位及对其细胞生长的影响,观察到AtVLN1在主根、侧根真叶、子叶、下胚轴、根尖以及根毛均上表达,并测量统计WT、Atvln1-1、Atvln1-2和AtVLN1-COM植株在子叶铺板细胞面积和叶铺板细胞复杂性、下胚轴细胞长度和宽度以及根尖伸长区细胞长度和宽度均没有明显差异,说明AtVLN1可能没有对子叶、下胚轴、根的细胞生长起到调节作用。通过AtVLN1在根毛中的定位及对其细胞生长的影响,盐和渗透胁迫下AtVLN1在根毛中的表达及对其细胞生长的影响,观察到AtVLN1在拟南芥根毛中表达,在正常条件下,Atvln1-1、Atvln1-2生长3 d、6 d、9 d的根毛长度都明显长于WT和AtVLN1-COM,说明AtVLN1在拟南芥根毛生长过程中起负向调控作用,随着盐和渗透胁迫时间的延长,拟南芥野生型根毛中AtVLN1的表达逐渐下调,在盐和渗透胁迫下,Atvln1-1、Atvln1-2的根毛长度明显长于WT和AtVLN1-COM,说明在盐和渗透胁迫下AtVLN1也负向调控根毛细胞生长。综上所述,微丝结合蛋白AtVLN1对植株子叶、下胚轴、根细胞的生长无明显作用,但AtVLN1在拟南芥根毛细胞生长过程中起负向调控作用,盐和渗透胁迫下AtVLN1也负向调控根毛细胞生长。从而表明拟南芥微丝结合蛋白AtVLN1具有调节根毛细胞生长的作用。
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