论文部分内容阅读
番木瓜快繁技术体系的整个流程,前人已基本建立。但在这个体系中尚有一些问题值得探讨,比如外植体消毒污染率高、生根培养中根系发育不良、组培芽增殖过程中易黄化(衰老)、移栽生长不理想等是限制番木瓜组培工厂化生产的几大难题。本论文就这几个问题进行了探讨,并得出如下结论:
1.研究认为采用“预处理+表面消毒+灭内生菌”的方法可以显著降低外植体污染率和提高外植体的成活率,是一种较为实用的外植体的消毒方法。预处理的程序为:自来水冲净→饱和香皂水振荡20 min→自来水冲净→0.1%KMnO45 min→无菌水3次;表面消毒程序为:75%的洒精30 s→无菌水2次→4% NaClO(内加吐温20)10~12 min→无菌水3次;灭内生菌的程序为:羧苄青霉素500μg/ml(mg/L)的液体MS培养基中光下振荡培养2d。
2.通过增殖培养基中添加与乙烯产生相关的促进剂和抑制剂发现,凡是增加乙烯产量的处理,其叶片衰老指数增大,凡是减少乙烯产量的处理,其叶片衰老指数减少,说明番木瓜组培过程中易发生黄化和衰老的原因与增殖过程中培养瓶内乙烯的累积量有关。
3.根据本研究结果,可以通过以下措施延缓番木瓜增殖过程中叶片的衰老现象:选用无菌透气性膜作封口材料;在增殖培养基添加0.2 mM STS或1.0μM AVG两种抑制乙烯产生的物质;培养室控制温度和光照强度分别在25℃左右和3000 lx左右较好。
4.对生根过程中影响根系发生和发育原因进行了探讨,发现诱根培养阶段培养基中IBA的浓度是影响诱根效果的主要因子,其次是诱根天数,本试验发现在2.0 mg/LIBA下诱导4d的效果较好;长根培养基中琼脂、蔗糖和活性炭的用量以及盐(MS)的浓度是几个主要影响因子,其最佳用量分别为10 g/L的琼脂、40 g/L蔗糖、0.5 g/L活性炭和1/2 MS的盐;如果通过在诱根培养基添加0.5 mg/L核黄素或者先经100 mg/LIBA蘸根1h处理再直接接种于长根培养基的办法则可以实现把两步生根变为一步生根;此外,生根前材料的选取和处理也是影响根系发生和发育的因子,结果认为取带5片小叶的茎尖,并在距离茎尖基部小于0.5 cm处作长度为1~2 mm的纵切可以显著提高生根率。
5.本研究发现生根苗的株高、叶片数、根数以及炼苗的方法是影响番木瓜生根苗移栽成活率的几个主要因子,通过原培养瓶内闭瓶+开瓶炼苗法炼苗7d后,选用株高为4~5 cm、根数大于6条、至少带5片小叶的生根苗进行移栽,并配合浇灌Hoagland营养液可以明显提高移栽成活率。