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目的: 在既往实验的基础上寻找最优的含海藻糖的关节软骨玻璃化保护液体,提高体外冷冻保存关节软骨的效果,为软骨移植临床应用奠定基础。 方法: 实验采用猪的膝关节软骨为研究对象,常规在猪膝关节内外侧股骨髁负重区切取圆柱性软骨块,其直径4.5mm,全长10mm,共64枚,随机分为四组,每组16枚。基础组(A组)为对照组,其余各组为不同浓度海藻糖B组、C组、D组,浸泡时间为30min,然后以最快速度直接投入液氮中保存2周、8周,复温后用FDA-EB荧光染色检测细胞存活率,以选择最优海藻糖浓度组。 结果: 第8周各组的软骨细胞存活率依次为:A组61.41%、B组62.78%、C组62.37%、D组68.72%。各组间两两比较有统计学差异,其中D组软骨细胞存活率与其他组别相比显著增高,证实应用含有D组海藻糖浓度的保护液保存软骨时可显著提高软骨的细胞存活率。 结论: 与对照组保护液相比较,D组玻璃化保护液能显著提高玻璃化保存后软骨细胞的存活率。