本实验分三个部分研究了骨髓源神经干细胞的特点。第一部分研究了应用特制的神经干细胞培养基诱导培养骨髓源神经干细胞与胎脑源神经干细胞,并分别对其细胞生物学特性进行研究。第二部分应用原子力显微镜观察两种来源神经干细胞生长不同阶段的形态特点,结合其细胞生物学的特点,对其表面形貌进行了比较研究。第三部分研究通过调控JAK/STAT信号通路的表达,研究其对骨髓源神经干细胞增殖、分化影响及机理。 第一章 大鼠神经干细胞培养及生物学特性的观察 第一节 大鼠骨髓源神经干细胞培养及生物学特性的观察 目的: 探讨诱导形成骨髓来源的神经干细胞并进行初步纯化的方法,对骨髓源神经干细胞生物学特性进行研究。 方法: 1、骨髓源神经干细胞诱导培养及纯化:采用密度梯度离心法分离骨髓基质细胞,应用特制的神经干细胞培养基,加入bFGF20ng/ml、RA300ng/ml诱导培养6天,吹打收集贴壁细胞并传代培养纯化。 2、MTT法检测传代细胞的增殖,绘制生长曲线。 3、流式细胞仪检测传代细胞的细胞周期。