CdTe量子点的制备、表征及在荧光探针中的应用

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因量子点具有吸收光谱宽,发射光谱窄而对称,通过调节组成和大小可以使其发射出不同颜色的光,并且具有较高的荧光强度和光稳定性等特点,克服了传统有机荧光染料的诸多不足之处,有望成为其作为荧光探针的替代物。尽管其在生物学中的应用才刚刚起步,但是已经取得了有意义的进展,成为人们极为关注的一个热点。但还有很多有待解决的问题:如何发展和完善量子点的合成方法,提高产品的稳定性及生物相容性,以及怎样采取更好的方法解决量子点与生物分子偶联,形成稳定、特异性的探针等等。 本项工作在前人工作的基础上,主要做了如下方面的研究: 1、进一步提高CdTe的量子效率。这主要通过以下途径实现:a、通过优化水热法的温度,发现发射绿色荧光的量子点的最佳生长温度是140℃;发射黄、橙、红色荧光的量子点的最佳生长温度是180℃;b、提高CdTe量子效率最好的方法是找到更适合的表面修饰剂。用半胱胺做修饰剂直接水相法,无需回流,就合成了荧光效率更高的CdTe量子点。半胱胺-CdTe量子点表面带正电荷、吸收光谱宽、荧光光谱峰对称、半峰宽更狭窄,荧光效率约20%(以异硫氰酸荧光素为标准),以前用该法合成的量子点荧光效率低于10%,甚至无荧光,但该量子点的稳定性稍差。 2、尝试CdTe量子点在生物分析中的应用。这包括以下两个方面的尝试:a、虽然牛血清白蛋白(BSA)和CdTe的链接问题已基本解决,但尚无其他应用,本文通过对链接条件的优化,建立用CdTe做荧光探针定量测试BSA的方法,在最佳实验条件下,建立了定量分析的标准曲线。结果表明,当QDs的浓度为2×10-4mol/L,在BSA的浓度为0.4-2.0/mg/L时,体系的荧光强度与BSA的浓度呈良好的线性关系。线性回归方程为RF=204.26+54.96 C,相关系数为0.9992,检出限为0.09 mg/L;b、利用半胱胺-CdTe量子点表面的正电荷分别与相同序列的磷酸化和无磷酸化的DNA链接,链接DNA后可使量子点荧光强度显著增强,而且发现半胱胺修饰的CdTe量子点还可以与磷酸缓冲溶液作用,使量子点的荧光猝灭,半峰宽变宽,发射峰位蓝移。
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