RAGE特异性拮抗剂FPS-ZM1在局灶性脑梗死大鼠的治疗作用

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背景与目的:糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)是隶属于细胞表面免疫球蛋白超家族的一种多配体受体。许多研究认为RAGE的表达与多种神经炎性及神经退行性疾病有关。本研究探讨局灶性脑梗死大鼠模型中RAGE表达水平与脑梗死疾病进展的病理生理关系,与其特异性拮抗剂FPS-ZM1在其中的治疗作用,旨在为以RAGE为靶点改善脑梗死进展治疗的临床转化研究提供实验依据。材料与方法:第一部分,将46只Sprague-Dawley雄性大鼠麻醉后分别行电凝法永久性大脑中动脉阻断(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)及假手术,在术后12小时、1天、3天、7天、14天、30天行神经功能缺损评分,取脑组织行蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RAGE及其配体糖基化终末产物(advanced glycation end-products,AGE)、高迁移率族蛋白B1(High mobility group box 1,HMGB1)的表达水平,免疫组织荧光法检测S-100钙结合蛋白B(S100 calcium-binding protein B,S100B)阳性细胞的数量。第二部分,18只Sprague-Dawley雄性大鼠分别在pMCAO术后腹腔注射低中高浓度FPS-ZM1,术后第7天取脑组织行Western blot检测RAGE的表达水平。第三部分,61只Sprague-Dawley雄性大鼠在pMCAO术后腹腔注射1mg/kg RAGE特异性拮抗剂FPS-ZM1,连续注射7天后,行神经功能缺损评分、2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色、尼氏染色,并检测核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路及炎症因子的表达水平。结果:局灶性脑梗死大鼠大脑皮层梗死中心及梗死周边区RAGE及其配体AGE的表达水平和梗死周边区域S100B阳性细胞数量在梗死后逐渐上升,在第7天达到峰值。腹腔注射1mg/kg FPS-ZM1可显著改善局灶性脑梗死大鼠神经功能缺损,减少脑梗死面积及梗死周边区域神经元死亡,抑制RAGE及其配体AGE、S100B的表达,抑制NF-κB通路蛋白的激活并减少促炎因子的表达,减少梗死中心及梗死周边区域Aβ累积。结论:局灶性脑梗死大鼠短期内出现与神经功能缺损相关的RAGE高表达和RAGE相关配体AGE、S100B累积。RAGE特异性拮抗剂FPS-ZM1对脑梗死有潜在性治疗作用,可抑制RAGE/NF-κB通路的激活,减少RAGE、S100B及促炎因子的表达和AGE、Aβ的累积,减少脑梗死面积和神经元死亡,并改善局灶性脑梗死大鼠神经功能缺损。
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