巴西橡胶树自根幼态无性系与供体老态无性系胶乳蛋白质差异表达分析

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天然橡胶是重要的战略物质和工业原料,在国民经济发展中具有十分重要的地位和作用。在我国植胶面积有限的情况下,提高良种覆盖率才是大幅度提高橡胶产量的有效途径。作为一种新型的种植材料,橡胶树自根幼态无性系具有生长速度快、产胶量高、抗逆性强的特点。而橡胶树自根幼态无性系高产机制的研究还很少,现在仅有一些形态学和生理学的研究,如橡胶树胶乳生理指标与胶乳产量高低具有相关性,而缺乏直接的分子生物学证据。结合本实验室表观遗传研究及转录组学差异基因克隆技术,比较蛋白质组学与之的互补应用,为我们从系统生物学角度研究橡胶树自根幼态无性系高产机制提供了强有力的手段。我们利用高通量的蛋白质组学技术平台分析了橡胶树自根幼态无性系和其供体老态无性系中的差异表达蛋白质,揭示了橡胶树自根幼态无性系高产机制的关键功能蛋白质。本论文工作包括两个部分:1.生理生化指标测定;通过对橡胶树自根幼态无性系和其供体老态无性系胶乳生理生化指标测定,包括干胶含量测定(老态无性系:30.16%,幼态无性系:33.05%),PH值(老态无性系:6.77,幼态无性系:6.94),硫醇含量(老态无性系:0.44mM/L,幼态无性系:0.54 mM/L),无机磷含量(老态无性系:11.65 mM/L,幼态无性系:17.35mM/L),蔗糖含量(老态无性系:2.9 mM/L,幼态无性系:2.4 mM/L),蔗糖转移酶提取及活性测定(老态无性系:0.636U,幼态无性系:0.457U)。2.蛋白质组学技术平台的建立与完善,为后续研究工作奠定基础。改进和优化橡胶胶乳蛋白的提取方法及电泳条件,得到了高分辨率、高重现性、可比性和稳定性的双向凝胶电泳图谱。通过胶乳蛋白组学分析找到了37个差异蛋白。经MALDI-TOF-MS鉴定,有27个阳性结果,其中24个蛋白得到成功的鉴定。而与高产机制可能相关的蛋白有10个。这些蛋白得功能主要集中在碳水化合物和能量代谢,次生代谢,信号转导,转录调控,蛋白质合成组装和降解,运输,核酸过程,质膜代谢,未知功能蛋白几类。
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