【摘 要】
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研究目的:本实验以颈型颈椎病模型兔为研究对象,通过观察各组兔颈半棘肌病理形态学变化及椎间盘髓核中Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、P-FAK（磷酸化FAK）蛋白含量以及血液中白介素8、肿瘤坏死因子α、前列腺素E2含量变化,探讨基于P-FAK信号通路,针刀治疗颈型颈椎病发挥的作用机制。研究方法:按随机数字表法将24只新西兰家兔分为空白组、模型组、针刀组各8只,空白组正常饲养,模型组与针刀组采用“低头位加寒湿刺激”
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研究目的:本实验以颈型颈椎病模型兔为研究对象,通过观察各组兔颈半棘肌病理形态学变化及椎间盘髓核中Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、P-FAK（磷酸化FAK）蛋白含量以及血液中白介素8、肿瘤坏死因子α、前列腺素E2含量变化,探讨基于P-FAK信号通路,针刀治疗颈型颈椎病发挥的作用机制。研究方法:按随机数字表法将24只新西兰家兔分为空白组、模型组、针刀组各8只,空白组正常饲养,模型组与针刀组采用“低头位加寒湿刺激”法建立异常应力诱导下的兔颈型颈椎病模型,通过颈椎X线影像学验证造模是否成功。针刀组在造模结束一周后进行干预,每7d治疗一次,共4次。每组均在干预7d后进行取材,采用HE染色法观察各组颈半棘肌病理组织形态学改变;采用Western Blot检测椎间盘髓核中Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、P-FAK蛋白含量;采用免疫组化法检测椎间盘中Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原含量;采用ELISA法检测血液中白介素8、肿瘤坏死因子α、前列腺素E2含量变化。研究结果:1、一般情况观察:空白组兔一般状况良好,颈部自主活动正常,手下触诊颈部无硬结或条索出现,肌肉松软有弹性;模型组兔饮食饮水减少,手下触诊颈部可扪及条索状或颗粒状筋结,颈部肌肉僵硬紧张;针刀组兔饮食饮水在针刀治疗后有所好转,手下触诊有少量颗粒状筋结。2、颈椎X线结果观察:空白组兔颈椎生理曲度正常,椎间隙正常,无骨质增生、骨赘产生;与空白组兔比较,模型组兔和针刀组兔颈椎生理曲度出现不同程度的反弓,出现椎间隙变窄、小关节突增生等病理改变;经针刀治疗后,家兔颈椎生理曲度异常、椎间隙狭窄情况较模型组均有所改善。3、HE染色结果:空白组兔颈半棘肌横断面及纵切面组织着色较均匀,粗细相近,结构清晰,肌纤维排列较整齐;模型组兔颈半棘肌横断面和纵切面可见肌纤维着色不均,粗细不一,结构紊乱,节段扭曲改变,细胞核增多,大小不一,可见炎性细胞浸润。针刀组兔颈半棘肌横断面及纵切面光镜下染色观察接近空白组,肌纤维较平直未见明显扭曲,虽可见细胞核增多,肌纤维断裂,但少于模型组兔。4、WB结果:与空白组兔比较,模型组兔椎间盘髓核中Ⅰ型胶原、P-FAK蛋白含量明显升高（P＜0.01）;与模型组比较,针刀组Ⅰ型胶原、P-FAK蛋白含量明显降低（P＜0.01）。与空白组兔比较,模型组兔椎间盘髓核中Ⅱ型胶原蛋白含量明显降低（P＜0.01）;与模型组兔比较,针刀组兔Ⅱ型胶原蛋白含量明显升高（P＜0.01）。5、免疫组化结果:显微镜下观察,阳性表达是以细胞外基质见到棕黄色阳染颗粒为判断标准,检测结果显示,与空白组兔相比,模型组兔椎间盘中Ⅰ型胶原蛋白含量明显增高（P＜0.01）,Ⅱ型胶原蛋白明显降低（P＜0.01）;与模型组兔相比,针刀组兔椎间盘中Ⅰ型胶原蛋白含量明显降低（P＜0.01）,Ⅱ型胶原蛋白表达明显增高（P＜0.01）。6、ELISA法结果:与空白组兔比较,模型组兔血清IL-8、TNF-α、PGE2水平均明显升高（P＜0.01）;与模型组兔比较,针刀组兔血清IL-8、TNF-α、PGE2水平均明显降低（P＜0.01）。结论:1.由影像学和组织形态学结果可见,本实验所采用的“低头位加寒湿刺激”制作颈型颈椎病模型兔的方法具有可行性。2.针刀可以起到消除肌肉筋结条索、修复肌纤维紊乱排列的作用,促进组织修复。3.针刀治疗颈型颈椎病的可能作用机制是通过力学相关刺激抑制P-FAK水平,减少炎症因子的释放,从而降低炎症水平,减轻疼痛,恢复颈肌动力平衡作用,抑制Ⅰ型胶原和Ⅱ型的转换,提高椎间盘中Ⅱ型胶原蛋白含量,恢复椎间盘弹性,恢复颈椎静力平衡,以达到减缓椎间盘退变进程,重建颈椎力学平衡的作用。
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