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目的探讨miR-221对卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响。方法1)利用miR-221 inhibitor,inhibitor NC分别转染大鼠气道平滑肌细胞(Airway smooth muscle cells,ASMCs),通过RT-qPCR技术验证miR-221 inhibitor的转染效率,并通过Western Blot技术检测细胞外基质Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达水平变化。2)构建OVA诱导的慢性哮喘小鼠模型,同时通过6型腺相关病毒(Adeno associated virus,AAV)为载体对小鼠进行气道干预。小鼠随机分为4组:对照组(GFP-NS组)、miR-221下调组(miR-221↓-NS组)、哮喘组(GFP-OVA组)、miR-221下调哮喘组(miR-221↓-OVA组),通过RT-qPCR验证各组小鼠miR-221的表达水平。同时通过肺功能仪器检测不同浓度梯度乙酰甲胆碱(Methacholine,Mech)激发下各组小鼠肺功能,包括呼气阻力(Expiratory resistance,Re)、吸气阻力(Inspiratory resistance,Ri)和动态肺顺应性(Dynamic lung compliance,Clydn)的变化。3)对小鼠肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行总细胞计数及嗜酸粒细胞计数,同时通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immuno sorbent asssy,ELISA)测定血清和肺泡灌洗液中炎症因子IL-6、TNF-α的浓度。4)通过小鼠肺组织HE染色观察气道炎症浸润情况,通过PAS染色观察小鼠气道上皮杯状细胞增生改变及黏液分泌情况,采用RT-qPCR检测黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达水平变化,通过Masson染色观察气道胶原纤维增生情况。5)通过Western Blot技术检测小鼠肺组织细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达水平的变化。结果1)细胞水平实验结果显示:下调ASMCs中miR-221能减少细胞外基质I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。2)miR-221下调的小鼠哮喘模型能成功建立。同时下调miR-221能减轻哮喘小鼠肺功能的改变,主要包括降低Re、Ri以及增高Clydn。3)下调miR-221能使哮喘小鼠BALF总细胞计数及嗜酸粒细胞计数下降,同时能降低血清和BALF中IL-6、TNF-α的浓度。4)下调miR-221能减轻哮喘小鼠气道炎症浸润水平,减轻气道壁厚度,也能减少气道上皮杯状细胞增生及黏液分泌,降低MUC5AC的表达水平,同时能减轻气道胶原纤维增生水平。5)下调miR-221能减少哮喘小鼠肺组织细胞外基质Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结论下调miR-221能减少ASMCs细胞外基质的表达,也可减轻OVA诱导的哮喘小鼠气道炎症及气道重塑。