含NGF、NT-3、BDNF的聚乳酸—羟基乙酸(PLGA)微球对SD大鼠坐骨神经损伤修复的实验研究

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目的:以PLGA (PLA:PGA=85:15)做为微球系统囊壁材料,内容物采用NGF、NT-3、BDNF,制造出直径约300um的高分子缓释微球,植入受损的大鼠坐骨神经,以证明该种微球对于大鼠坐骨神经损伤的修复有一定作用。方法:使用PLGA为材料,溶于二氯甲烷后,加入含NGF、NT-3、 BDNF的磷酸盐缓冲液,通过搅拌、超声乳化、过滤、离心等步骤后,制成含神经营养因子的高分子微球。并检测微囊的体外释放效果。然后取30只成年SD大鼠做为实验对象,分为实验组与对照组,在大鼠左下肢梨状肌下方约1cm处显露坐骨神经,切断后予以端端吻合,实验组在坐骨神经吻合处沿坐骨神经行径纵行植入高分子微球6颗。对照组仅吻合神经。在术后6周观察各组SD大鼠的坐骨神经功能恢复情况,并于6周后各组术侧进行小腿三头肌湿重测定、电生理检测、组织切片等测定。并取出使用后微囊再次测定体外释放效果并与前面数据作对比。结果:1.微球顺利制成。2.植入微球后的SD大鼠实验组死亡一只、对照组死亡两只,不计入实验结果。其余SD大鼠术后实验组坐骨神经功能恢复明显优于对照组。小腿三头肌测定发现实验组大鼠小腿三头肌重量明显高于对照组。(统计学指标P<0.01)电生理检测中实验组神经传导速度及最大波幅明显优于对照组。(统计学指标P<0.01)组织切片中可见实验组新生神经纤维数量多,较密集,排列均匀,并可见新生的毛细血管,且髓鞘相较对照组要厚。对照组神经纤维数量及密集程度均少于实验组,并且排布不均,较散乱。3.制得微球在溶液中可持续释放神经营养因子,前5天释放量较少,5日后释放速度明显增高,并在10-15日左右达到高峰,并维持至45日左右,在45日后释放量逐渐开始下降,但60日时仍可测得溶液内有神经营养因子释放。4.SD大鼠体内所取出使用后微球再次进行体外释放测试时发现其仍具有持续释放效果。结论:1.以PLGA做为微球系统的材料可有助于周围神经修复。2.搭载NGF、NT-3、BDNF三种神经营养因子的PLGA微球可促进SD大鼠坐骨神经损伤后修复。3.该微球系统体外释放效果良好,且使用过后从动物体内所取出微球仍含一定神经生长因子并可体外继续持续释放。4.神经缝合技术、微球内装药量的少许差异,微球降解情况的不一可明显影响SD大鼠坐骨神经损伤后的修复效果。
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