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【目的】检测乙酰辅酶A合成酶2(Acyl-coenzyme A synthetase short-chain family member 2,ACSS2)对人食管鳞癌细胞放疗敏感性的影响,探讨其影响食管鳞癌放疗敏感性的相关分子机制。【方法】(1)Western blot法检测食管鳞癌细胞(TE-1,TE-10,ECA-109,,KYSE-150)和正常食管上皮细胞HET-1A在正常培养(含10%胎牛血清的DMEM)与营养缺乏处理(含1%胎牛血清的DMEM培养基)后ACSS2的表达变化情况;(2)荧光定量PCR检测营养缺乏处理不同时间(24 h,48 h,7 day)的食管鳞癌细胞中ACSS2的mRNA含量;Western blot法检测食管鳞癌细胞在营养缺乏不同时间(0 day,1 day,2 day,7 day,30 day)后ACSS2的表达情况;CCK-8细胞增殖实验检测不同处理组(对照组,营养缺乏组,干扰组,营养缺乏加干扰组)细胞增殖情况;Western blot法检测不同处理组Ki67的表达情况;(3)流式细胞术检测不同处理组(对照组,营养缺乏组,干扰组,营养缺乏加干扰组)的细胞周期分布情况;Western blot法检测不同处理组Akt,p-Akt,mTOR,p-m TOR的表达情况;Western blot法检测不同处理组(对照组,氯喹组,营养缺乏组,营养缺乏加干扰组)LC3B-II,ATG5,ATG7的表达情况;(4)将实验组分为对照组,营养缺乏组,干扰组,营养缺乏加干扰组,8 Gy照光,流式细胞术检测不同处理组的细胞凋亡率,Western blot法检测不同处理组cleaved caspase-3,Bcl-2,Bax的表达情况;按相同分组,细胞克隆实验检测食管鳞癌细胞在0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy五种不同放射剂量下的存活分数;(5)免疫组织化学染色法检测60例食管鳞癌病理切片癌组织和癌旁组织中ACSS2的表达情况,并检测ACSS2的表达与临床病理特征的相关性。【结果】(1)ACSS2在营养缺乏处理后表达上调。ACSS2在正常营养条件下,在四种人食管鳞癌细胞中都有表达,在正常食管细胞HET-1A中几乎不表达;而在营养缺乏处理后,在食管鳞癌细胞中表达都明显上调,在正常食管细胞中变化不明显;同时ACSS2的mRNA和蛋白的表达程度随着营养缺乏处理短期内升高,长期处理可以保持较高表达水平;(2)ACSS2的表达变化对食管鳞癌细胞的细胞增殖和细胞周期没有影响。CCK-8细胞增殖实验检测发现不同处理组在同时间段内的细胞增殖无明显区别;流式细胞术检测不同处理组细胞周期分布,差异无统计学意义;Western blot检测Ki-67,在不同处理组中表达无差异;(3)营养缺乏后,下调ACSS2可以促进Akt/mTOR信号通路的激活和抑制自噬的发生。营养缺乏组的p-Akt,p-mTOR,LC3B-II,ATG5和ATG7相对于对照组明显上调,干扰ACSS2后可以抑制上述蛋白的表达变化;(4)营养缺乏后,ACSS2升高抑制了由电离辐射引起的凋亡发生。流式细胞术及细胞克隆实验均显示,电离辐射处理后,营养缺乏诱导的ACSS2表达升高促进了食管鳞癌细胞的Bcl-2的表达上调同时抑制cleaved caspase 3的表达,从而抑制凋亡发生;下调ACSS2表达可以逆转这一趋势,促进凋亡出现。表明营养缺乏条件下的ACSS2累积促进了放疗抵抗的形成;(5)食管鳞癌组织中高表达的ACSS2影响患者预后。60例食管癌组织中,食管鳞癌组织病理切片中ACSS2有较强的表达,尤其在肿瘤细胞密集区域表达更明显,显著高于癌旁组织(p<0.05);ACSS2表达强度与病人的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、TMN分期无关,与五年生存期和淋巴转移相关(p<0.05)。【结论】营养缺乏诱导ACSS2表达上调,进一步调控Akt/mTOR通路促进食管鳞癌细胞自噬的发生,从而导致了以抑制凋亡为主的放疗抵抗形成。