孕晚期妇女B族链球菌的筛查及其分子流行特征分析

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目的了解青岛地区孕晚期妇女B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)的定植率,掌握其耐药性、耐药表型、耐药基因、毒力基因、血清型分型及分子分型等特征,为有效预防和治疗孕产妇和新生儿的GBS感染提供分子流行病学数据。方法收集2017年12月~2018年12月在青岛大学附属青岛市市立医院门诊就诊的妊娠35~37周孕妇的阴道-直肠拭子,分离培养后经CAMP试验和VITEK 2Compact全自动细菌鉴定仪进行菌株的鉴定和药敏试验,用D试验进行耐药表型检测。应用凝集法进行血清型分型。聚合酶链反应(PCR)检测红霉素耐药基因(ermA、ermB、ermC及mefA/E)、克林霉素耐药基因(linB)和毒力基因(lmb、bac、scpB、rib及hylB)。用PCR扩增GBS的7个管家基因,测序后进行多位点序列分型(MLST),串联每个ST型的7个管家基因序列后用Geneious 10.0软件做进化分析。用SPSS 24.0软件对结果进行统计分析。结果(1)筛查1265例孕晚期妇女标本,检出GBS 54株,定植率为4.3%。(2)54株GBS中共检测到5种血清型,分别为Ⅰa型(3.7%)、Ⅰb型(31.5%)、Ⅱ型(3.7%)、Ⅲ型(44.4%)及Ⅴ型(9.3%)。(3)所有菌株对青霉素、氨苄青霉素、万古霉素、利奈唑胺均敏感,对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星和四环素的耐药率分别为66.7%、70.4%、74.1%和53.7%。对大环内酯类药物的耐药表型结果分别为cMLSB耐药表型(77.8%)、iMLSB耐药表型(19.4%)及M耐药表型(2.8%)。红霉素耐药的GBS菌株共有36株,其中有4株检测出ermA基因,检出率为11.1%;有27株检测出ermB基因,检出率为75.0%;有24株检测出ermC基因,检出率为66.7%;有8株检测出mefA/E基因,检出率为22.2%。在克林霉素耐药的菌株中没有发现耐药基因linB。(4)对54株GBS菌株进行毒力基因检测,lmb的检出率最高,为90.7%,其次scpB为88.9%,hyl B为81.5%,rib为42.6%及bac为31.5%。(5)MLST分型共分出13个ST型,分别是ST10型20株,占37.0%,ST19型16株(29.6%),ST27型6种(11.1%),ST12型和ST862型各为2株(3.7%),余下ST1型、ST17型、ST26型、ST171型、ST485型、ST676型、ST921型及ST1519型各为1株(1.9%),其中ST1519型为新发现的分型。13个ST型聚集形成5个克隆复合群,分别为CC19(44.4%)、CC10(40.7%)、CC17(3.7%)、CC485(5.6%)和CC1(3.7%),余下1株为ST型单体。GBS的MLST分型、血清型与耐药基因和毒力基因均存在显著相关性,如ST10/Ⅰb型与毒力基因bac,同时携带耐药基因ermB和ermC;ST19/Ⅲ型与毒力基因rib。结论(1)青岛地区孕晚期妇女GBS的定植率为4.3%。(2)54株GBS中主要的流行血清型为Ⅲ型、Ⅰb型和Ⅴ型。(3)GBS对大环内酯类、林可霉素类和喹诺酮类药物的耐药率较高,β内酰胺类药物仍可作为预防和治疗GBS感染的一线药物。红霉素耐药基因主要为ermB、ermC和mefA/E。(4)GBS携带的主要毒力基因为lmb、scpB和hylB。(5)MLST分型主要是ST10、ST19和ST27型,主要的克隆复合群为CC19和CC10。MLST分型、血清型与耐药基因和毒力基因均有显著相关性,并且红霉素耐药机制复杂,致使特定的GBS菌株广泛流行。各级医疗机构应进一步提高GBS常规筛查和细菌耐药监测的能力。
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