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目的:运用中医经典方剂大建中汤干预脾阳虚胃癌大鼠模型,通过检测大建中汤治疗前后脾阳虚胃癌大鼠胃组织中环氧合酶-2(Cox-2)、核转录因子-κB(NF-κB)基因和蛋白的表达,探讨大建中汤治疗脾阳虚胃癌的分子作用机制,为温阳法治疗肿瘤提供新的科学依据。
方法:取SD大鼠70只,随机分为5组,即正常组(A组)、模型组(B组)、大建中汤大剂量组(C组)、大建中汤小剂量组(D组)和环磷酰胺组(E组),每组14只(雌雄分开饲养)。脾阳虚胃癌模型制备:除正常组外,其余各组均以饮食失调、劳倦过度、苦寒泻下法综合复制脾阳虚动物模型,再予稀释好了的N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)液,诱导脾阳虚胃癌动物模型。药物干预:正常组、模型组按一般条件饲养并灌胃可饮用纯净水。药物组分别给予大建中汤大、小剂量和环磷酰胺干预。观察大鼠一般情况,光镜观察胃组织病理改变;取胃组织用PCR法和免疫组化法检测Cox-2、NF-κB基因和蛋白的表达。
结果:1、正常组大鼠体重明显增加,饮食、活动自如,肛温无明显变化,其它亦无明显改变。其余各组大鼠在造模结束后,出现精神倦怠,少食,消瘦,少动,聚堆,大便溏薄,肛周污浊,体重、肛温下降。通过HE染色,正常组大鼠胃粘膜层各组织无特异性改变,结构完整无缺;造模各组大鼠胃粘膜镜检切片可见不同程度腺体异型增生,未突破基底膜,胃粘膜内腺体细胞核大而浓染,核浆比例增大,核分裂相增多,细胞排列紊乱,极性消失等表现。
2、与正常组比较,模型组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较各给药组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与环磷酰胺组比较,大建中汤大剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达无差异(P>0.05);大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达升高(P<0.01)。与大建中汤大剂量组比较,大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达升高(P<0.05)。大建中汤大剂量组治疗效果优于大建中汤小剂量组(P<0.01)。
3、与正常组比较,模型组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较各给药组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与环磷酰胺组比较,大建中汤大剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量无差异(P>0.05);大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量升高(P<0.01)。与大建中汤大剂量组比较,大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量升高(P<0.01)。大建中汤大剂量组治疗效果优于大建中汤小剂量组(P<0.01)。
结论:1.大建中汤可能通过降低Cox-2、NF-κB基因和蛋白表达从而发挥改善脾阳虚胃癌大鼠症状。
2.大建中汤大剂量组治疗效果优于大建中汤小剂量组。
方法:取SD大鼠70只,随机分为5组,即正常组(A组)、模型组(B组)、大建中汤大剂量组(C组)、大建中汤小剂量组(D组)和环磷酰胺组(E组),每组14只(雌雄分开饲养)。脾阳虚胃癌模型制备:除正常组外,其余各组均以饮食失调、劳倦过度、苦寒泻下法综合复制脾阳虚动物模型,再予稀释好了的N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)液,诱导脾阳虚胃癌动物模型。药物干预:正常组、模型组按一般条件饲养并灌胃可饮用纯净水。药物组分别给予大建中汤大、小剂量和环磷酰胺干预。观察大鼠一般情况,光镜观察胃组织病理改变;取胃组织用PCR法和免疫组化法检测Cox-2、NF-κB基因和蛋白的表达。
结果:1、正常组大鼠体重明显增加,饮食、活动自如,肛温无明显变化,其它亦无明显改变。其余各组大鼠在造模结束后,出现精神倦怠,少食,消瘦,少动,聚堆,大便溏薄,肛周污浊,体重、肛温下降。通过HE染色,正常组大鼠胃粘膜层各组织无特异性改变,结构完整无缺;造模各组大鼠胃粘膜镜检切片可见不同程度腺体异型增生,未突破基底膜,胃粘膜内腺体细胞核大而浓染,核浆比例增大,核分裂相增多,细胞排列紊乱,极性消失等表现。
2、与正常组比较,模型组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较各给药组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与环磷酰胺组比较,大建中汤大剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达无差异(P>0.05);大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达升高(P<0.01)。与大建中汤大剂量组比较,大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB mRNA表达升高(P<0.05)。大建中汤大剂量组治疗效果优于大建中汤小剂量组(P<0.01)。
3、与正常组比较,模型组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较各给药组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与环磷酰胺组比较,大建中汤大剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量无差异(P>0.05);大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量升高(P<0.01)。与大建中汤大剂量组比较,大建中汤小剂量组胃组织中Cox-2、NF-κB蛋白含量升高(P<0.01)。大建中汤大剂量组治疗效果优于大建中汤小剂量组(P<0.01)。
结论:1.大建中汤可能通过降低Cox-2、NF-κB基因和蛋白表达从而发挥改善脾阳虚胃癌大鼠症状。
2.大建中汤大剂量组治疗效果优于大建中汤小剂量组。