【摘 要】
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伪结核棒状杆菌（Corynebacterium pseudotuberculosis,CP）是山羊和绵羊干酪样淋巴结炎（caseous lymphadenitis,CLA）的病原菌,它可以引起患病羊产肉量、产奶量、产毛量的下降。CLA是一种慢性传染病,感染初期无明显症状,而且CP可以在自然环境中存活很长时间,容易造成羊群的反复感染,造成巨大的经济损失。针对CLA的治疗,抗生素在临床中仍被广泛使用,
【基金项目】
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青海省重点研发与转化计划项目（编号:2018-NK-125）； 陕西省重点产业创新链（群）项目（2020ZDLNY02-06）；
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伪结核棒状杆菌（Corynebacterium pseudotuberculosis,CP）是山羊和绵羊干酪样淋巴结炎（caseous lymphadenitis,CLA）的病原菌,它可以引起患病羊产肉量、产奶量、产毛量的下降。CLA是一种慢性传染病,感染初期无明显症状,而且CP可以在自然环境中存活很长时间,容易造成羊群的反复感染,造成巨大的经济损失。针对CLA的治疗,抗生素在临床中仍被广泛使用,但治疗效果并不理想。因此,寻找一种有效控制并清除CP的方法具有非常重要的意义。噬菌体作为一种天然的抗菌剂很有希望成为CLA防控的有力工具。本试验旨在调查青海省CLA流行情况,分离CP噬菌体,并且探索其用于CLA治疗的可能性。研究结果具体如下:（1）从青海省三个地区采集了66份血清样本,利用本实验室建立的ELISA方法对血清进行了检测,结果显示三个不同地区羊场的CP抗体阳性率分别为68.75%、61.29%和31.58%。（2）从疑似CLA患病羊脓汁样品中分离纯化得到的病原菌在血平板上生长缓慢48 h开始出现针尖大小的白色干燥菌落,菌落经16S rRNA以及pld基因鉴定,与NCBI数据库中CP对应基因的相似度分别为100%和98%,山羊回归试验符合科赫法则。（3）从环境污水中分离出了一株可以裂解CP的噬菌体,噬菌斑呈针尖状,命名为M2。经透射电子显微镜观察发现噬菌体M2呈多面体形态,无尾,头部直径约为50nm。一步生长曲线测定结果显示噬菌体潜伏期为20 min;裂解周期为60 min;平均爆发量为690 PFU/cell。（4）将分离得到的噬菌体M2注射入CLA患病羊的脓包内,结果显示噬菌体可加速脓包的溃破、结痂、愈合,且脓汁中活菌数大量下降。本试验对青海省CLA的流行情况进行了初步调查,并成功分离了1株CP与1株可以裂解CP的噬菌体。本研究结果为羊CLA的防控提供了新思路。
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