论文部分内容阅读
近年来,免疫传感器作为一种新兴的生物传感器以其鉴定物质的高度特异性、敏感性和稳定性,显示出广阔的应用前景。电化学免疫传感器是将免疫技术与电化学检测相结合的一种新型免疫传感器,因其选择性好,分析速度快,灵敏度高,不受样品颜色、浊度的影响(即样品可以不经处理,直接进行检测),所需仪器设备相对简单,在免疫传感器研究中起着越来越重要的地位,已逐渐应用于食品工业、环境检测和临床医学等领域。 将纳米材料引入分析化学研究中,已成为分析化学的一个研究热点,已取得许多创新性研究成果。其中碳纳米管因其独特的力学、电子特性及化学稳定性,得到了人们的广泛关注。它具有粒径小、比表面积大、表面反应活性高、催化效率高等优异性质,还可作为固体促进剂,用于实现酶直接电化学,使它在电化学领域有着广阔的应用前景。利用碳纳米管修饰普通电极,或利用碳纳米管制作碳糊电极已被应用于生物小分子、气体的催化、生物大分子等的电化学研究中。本论文研究工作旨在研究纳米粒子组装电极上电化学检测信号的增强作用,结合生物分子识别物质—抗原/抗体的特异性,研制新型纳米组装电化学免疫传感器。本论文分别以辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶为标记酶,研制了两种高灵敏度、高选择性、简单的碳纳米管组装电化学免疫传感器。 第一章 引言 详细介绍了电化学免疫传感器的分类、抗原/抗体的固定化方法和免疫分析方法,评述了电化学免疫传感器的研究进展:简要地概述了碳纳米管在电化学领域中的应用:展望了电化学免疫传感器的发展趋势。 第二章 以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶的碳纳米管组装电化学免疫传感器的研究 以碳纳米管修饰玻碳电极为工作电极,研究了HRP-对苯二酚(HQ)-H2O2体系的电化学催化行为。比较碳纳米管修饰玻碳电极和玻碳电极上HRP-HQ-H2O2体系电化学催化行为。在优化的实验条件下,采用计时电流法测定HRP的线性范围为5.0×10-10~1.0×10-8gmL-1,检出限为2.5×10-10g mL-1。 以HRP标记IgG抗体,以HQ和H2O2为底物,研制了以辣根过氧化物酶为标记酶的碳纳米管组装电化学免疫传感器。将IgG抗原吸附固定在碳纳米管修饰电极的表面,然后在含IgG抗体和HRP标记IgG抗体的培育液中进行竞争反应。通过测定HRP催化H2O2氧化HQ生成产物的还原电流来测定IgG抗体。传感器对IgG抗体的响应在3.0×10-7~1.0×10-5g mL-1之间呈线性关系,相关系数0.9961,检出限为1.1×10-7g mL-1。该法具有灵敏度高和传感器制作简单等优点。将电极用于模拟血