sn-2位DHA磷脂酰丝氨酸(2-DHA-PS)兼具二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)的生物学功能,能改善老年人阿尔茨海默病、治疗脑萎缩、提高脑细胞活力、抗抑郁、治疗儿童多动症等。目前2-DHA-PS的生产方法无法获得纯度较高的产品,而以磷脂酰胆碱(PC)、丝氨酸为原料通过磷脂酶D(PLD)获得PS,再以此PS和DHA为底物,利用具有sn-2位转酯活性的磷脂酶A2(PLA2)进行酶法催化合成2-DHA-PS,将为2-DHA-PS的制备开辟新的途径。本研究获得了 PLA2基因序列,为适合其在毕赤酵母细胞中表达,进行密码子优化获得基因plA2m,将该基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K中,成功构建了重组质粒pPIC9K-plA2m,并将其转化到毕赤酵母GS115中,构建产PLA2的毕赤酵母工程菌株 GS115/pPIC9K-plA2m。对毕赤酵母工程菌株GS115/pPIC9K-plA2m产PLA2的摇瓶发酵条件进行了单因素优化,发现摇瓶最适发酵条件为:甲醇添加量1.5%(v/v)、装液量12.5mL、诱导初始pH 6.5、诱导温度28℃、转速300 r/min,发酵条件优化后工程菌株GS115/pPIC9K-plA2m酶活达到38.4 U/mL,与原发酵条件(甲醇添加量0.5%(v/v)、装液量50 mL、诱导初始pH 6.0、诱导温度30℃、转速200 r/min)下的酶活力22.4 U/mL相比提高了 72.4%。对PLA2的酶学性质进行了分析,其最适反应温度为40℃,在30℃-40℃条件下稳定;最适反应pH为8.0,在pH 6.0-9.0条件下稳定。对2-DHA-PS的催化合成进行了研究,首先以PC和丝氨酸为底物利用PLD催化合成PS,然后利用PLA2将PS的sn-2位脂肪酸水解,以该PS和DHA为底物,利用PLA2催化合成2-DHA-PS,经检测催化产物中2-DHA-PS转化率为3.01%。