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目的:1、通过检测具有长期吸烟史(吸烟时间超过30年)或香烟烟雾接触史(在未禁烟场所工作5天长达45年或平均每天出入这类场所13分钟达60年)的肺腺癌患者的肺癌组织中GSTP1、EGFR的基因表达情况,探讨GSTP1、EGFR与吸烟相关肺腺癌的关系。2、制作的香烟萃取物(Cigarette smoke extract, CSE)作用于正常支气管上皮细胞系、肺腺癌细胞系,检测作用前后GSTP1的基因及蛋白表达情况以及CSE对HBE,A549, NCI-H23, NCI-1299四种细胞系增殖生长的影响。方法:1、收集2012-2013年期间南昌大学第二附属医院心胸外科肺腺癌患者的肺癌组织及超过肿瘤边缘5厘米以上的癌旁组织,采取实时定量PCR技术检测癌组织及癌旁组织中GSTP1及EGFR的基因表达情况。2、使用红双喜牌烤烟型香烟制作香烟萃取物,并用含不同浓度CSE的培养基培养正常支气管上皮细胞系及三种肺腺癌细胞系,检测培养前后GSTP1的表达情况。3、采用MTT法检测CSE对正常支气管上皮细胞系及三种肺癌细胞系增殖生长的影响。结果:1、在28例标本中,有10例肺腺癌组织EGFR和GSTP1低表达,13例EGFR和GSTP1高表达,且在同一标本中EGFR和GSTP1表达量相似。2、相较于HBE,A549和NCI-1299两种腺癌细胞系GSTP1和EGFR基因表达表达下调,且同一细胞系中GSTP1和EGFR表达量相仿。用不同浓度CSE处理HBE细胞系,GSTP1和EGFR基因表达量均有不同程度的上调,且GSTP1和EGFR基因表达量相似。用不同浓度CSE处理A549,NCI-H23,NCI-1299三种肺癌细胞系,GSTP1在NCI-H23中表达上调,在A549和NCI-1299中表达下调。3、CSE2处理HBE, A549, NCI-H23, NCI-1299细胞系2h,6h,12h,24h,48h后,GSTP1蛋白表达在四种细胞系中均有不同程度上调。4、CSE处理四种细胞系后,HBE, A549, NCI-H23, NCI-1299细胞系半数抑制浓度IC50分别为3%,5%,3%,8%。结论:1、有长期吸烟史或香烟烟雾接触史的肺腺癌患者中部分患者出现GSTP1表达上调,提示GSTP1参与了吸烟相关肺腺癌的发生发展过程,同时GSTP1和EGFR可能存在协调作用。2、用CSE处理HBE后,GSTP1基因和蛋白均表达上调,证实了GSTP1参与了香烟烟雾有毒物质的清除过程,同时这一过程可能有EGFR的参与。3、经CSE处理后的正常支气管细胞系和三种肺癌细胞系GSTP1基因表达有细胞差异性(在HBE和NCI-H23中上调,在A549和NCI-1299中表达下调),以及蛋白表达均上调,说明GSTP1在正常肺细胞和癌细胞均发挥了香烟烟雾有毒物质的清除作用。相对于三种肺癌细胞,正常细胞中GSTP1上调更为明显,提示GSTP1在正常肺细胞中作用更明显。3、HBE, A549, NCI-H23, NCI-1299四种细胞系对抗CSE毒性能力不同,HBE,NCI-H23对香烟烟雾的抵抗能力较NCI-1299和A549差,其中NCI-1299抵抗能力最强。