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目的胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,手术、放射及化学药物治疗均难以治愈,呈侵袭性生长、易于复发,且多为原位复发,极少远处转移。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)能降解、破坏脑胶质瘤细胞周围基质(extracelluarmatrix,ECM)中的重要成分-胶原,脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell,BTSC)则可以通过缺失的基底膜向肿瘤周围组织侵润转移。本课题旨在通过免疫组化的方法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤干细胞标志物CD133蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况,分析二者之间的关系及可能作用,并试分析MMP-9、CD133与脑胶质瘤病理级别之间的关系,从而能更准确地评价胶质瘤的恶性程度、判断预后、制定有效的预防措施及治疗策略提供依据。方法分两部分:实验一、选取山东省济宁市第一人民医院神经外科2009年01月至2011年07月的66例胶质瘤标本。实验二、选取山东省济宁市第一人民医院神经外科2006年03月至2011年09月的24例复发脑胶质瘤患者标本。入选标准,参照WHO(2000年版)的分类及分级标准。实验组标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋。对照组15例为因颅脑外伤行内减压术而切除的正常脑组织,固定方法同上。均采用免疫组化二步法TM。以PBS代替一抗作空白对照,正常脑组织作对照。MMP-9蛋白阳性表达为细胞浆中出现棕黄色颗粒。CD133蛋白阳性表达为细胞膜出现棕黄色颗粒。计分标准均参照Hilbe等的方法,随机选取4个高倍镜视野(×400),计数视野内阳性细胞占细胞总数的百分比。标准为:未发现阳性细胞的为(-),阳性细胞数占细胞总数的25%以下为(+),25~50%为(++),51~75%为(+++),75%以上为(++++),分别计分为0、1、2、3、4分。采用统计学软件SPSS17.0对数据进行处理,结果根据数据类型,对结果分别选用非参数检验及Spearman等级相关分析,p<0.05为差异有统计学意义。结果实验一(1)15例正常脑组织标本中未检测到MMP-9、CD133蛋白表达。(2)66例人脑胶质瘤标本中CD133蛋白阳性表达率平均值为23.8511±27.77105(%),MMP-9蛋白阳性表达率平均值为30.0877±29.55121(%)。(3)CD133及MMP-9蛋白总的阳性细胞表达率呈正相关(p<0.01),即均随着胶质瘤病理级别的增加而增高。(4)人脑胶质瘤中CDl33蛋白的阳性细胞表达率和MMP-9蛋白阳性细胞表达率呈正相关(p<0.01)。实验二(1)15例正常脑组织标本中未检测到MMP-9、CD133蛋白表达。(2)24例脑胶质瘤患者两次手术标本中,CD133蛋白在原发脑胶质瘤标本中总的阳性表达率为30.5±30.0(%),在复发脑胶质瘤标本中总的阳性表达率为47.6±30.1(%),差异有统计学意义(p<0.05)。(3)24例脑胶质瘤患者两次手术标本中,MMP-9蛋白在原发脑胶质瘤标本中总的阳性表达率为38.0±28.4(%),在复发脑胶质瘤标本中总的阳性表达率为55.4±28.3(%),差异有统计学意义(p<0.05)。(4)CD133和MMP-9蛋白表达强度在原发、复发胶质瘤中均呈正相关,随着胶质瘤病理级别的增加而增高(p<0.01)。(5)24例脑胶质瘤患者两次手术标本中,复发后胶质瘤病理级别较原发增高8例,病理级别不变16例。可见复发后病理级别有增加趋势(p<0.01)。(6)CDl33蛋白的阳性细胞表达率和MMP-9蛋白阳性细胞表达率在原发、复发胶质瘤中都呈正相关(p<0.01)。二者之间存在密切关系。结论1、人脑胶质瘤标本中MMP-9和CD133蛋白高表达。而正常脑组织标本中无MMP-9和CD133蛋白表达。2、人脑胶质瘤标本中MMP-9和CD133蛋白阳性表达率,III、Ⅳ级(高级别)均明显高于I、II级(低级别)。3、人脑胶质瘤复发后胶质瘤病理级别有增加趋势。4、人脑胶质瘤标本中MMP-9和CD133蛋白阳性表达率在原发和复发胶质瘤中表达强度随病理级别增加而增强。5、复发脑胶质瘤标本中CDl33和MMP-9蛋白总的阳性表达率较原发脑胶质瘤标本中总的阳性表达率增高。6、MMP-9蛋白的阳性细胞表达率和CDl33蛋白阳性细胞表达率在原发和复发脑胶质瘤中都成正相关。