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背景与目的肝癌是一种侵袭性非常高的恶性肿瘤,致死率很高(1,2)。尽管医疗技术一直在发展,但目前肝癌的治疗效果却不够理想,死亡率仍在上升,预后较差(3,4)。因此,研究发现肝癌新的诊断及治疗靶点相当重要。SWELL1近年被发现是容积调节性离子通道VRAC不可缺少的组成部分(5-7)。研究表明,VRAC参与多种细胞功能,例如细胞迁移和增殖等(8-11)。目前,SWELL1与肿瘤的关系尚未明确,本研究拟探讨SWELL1与肝癌细胞增殖转移的关系及其分子作用机制,为肝癌的早期诊断和治疗提供新的生物靶点。方法(1)通过免疫组化分析SWELL1在126对肝癌组织及其相对应的癌旁组织标本中表达的水平,并随机抽取其中34对标本进行q RT-PCR测定SWELL1RNA表达差异。(2)统计学方法分析SWELL1与病历资料中年龄、性别、肿瘤大小、分化、转移情况、AFP、HBs Ag等是否存在关系,运用Kaplan–Meier方法作生存率分析。(3)在肝癌细胞系SMMC-7721和Huh7中运用si RNA低表达SWELL1,CCK8、平板克隆、划痕实验及Transwell细胞迁移实验等方法检测肝癌细胞的增殖及迁移能力的变化。(4)在肝癌细胞系Sk-hep-1和HCCLM3中运用质粒高表达SWELL1,通过一系列细胞学实验检测其增殖和迁移能力的变化。(5)在SMMC-7721细胞中利用慢病毒构建SWELL1稳定低表达细胞系,通过皮下注射和尾静脉注射构建裸鼠动物模型,研究SWELL1对肝癌细胞的增殖及转移的影响。(6)Western blot方法研究SWELL1影响肝癌细胞增殖及转移的分子机制。结果(1)免疫组化结果表明,在126对肝癌及癌旁标本中,SWELL1在癌组织中的表达明显增高;q RT-PCR结果表明,在随机抽取的34对肝癌标本中SWELL1RNA的表达量在癌组织中更高。(2)肝癌标本中SWELL1的表达与肿瘤大小、有无转移、HBs Ag(+)呈正相关,与性别、年龄、肿瘤分化及AFP无关。Kaplan–Meier生存率结果表明高表达的SWELL1与肝癌患者的不良预后相关。(3)在SMMC-7721和Huh7细胞中,CCK8和平板克隆方法检测SWELL1低表达的细胞和对照组细胞的增殖活性,发现SWELL1低表达细胞的增殖能力显著下降;划痕和Transwell细胞迁移实验结果发现SWELL1低表达细胞的迁移能力明显减弱。(4)在Sk-hep-1和HCCLM3细胞中,运用CCK8和平板克隆检测SWELL1高表达细胞与对照组的增殖能力,发现高表达SWELL1的细胞增殖能力明显增强;划痕和Transwell细胞迁移结果表明SWELL1高表达细胞的迁移能力明显提高。(5)在SMMC-7721细胞中慢病毒转染构建SWELL1稳定低表达细胞系,分别皮下注射和尾静脉注射裸鼠,发现注射SMMC-7721-sh SWELL1的裸鼠皮下的肿瘤比对照组更小,肝肺转移也较对照组更加明显。(6)Western blot结果表明SWELL1与MAPK信号通路中的JNK通路有关。结论(1)SWELL1在肝癌中高表达并与患者的不良预后有关。(2)SWELL1促进肝癌细胞在体内外的增殖和转移能力。(3)SWELL1通过JNK通路促进肝癌细胞迁移。