绿叶汁发酵液在青贮饲料生产中的应用研究

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1.以饲料玉米(2009年10月采自新疆吐鲁番地区的新疆饲料玉米1号)为原料进行微生物数量分析,实验结果为乳酸菌数为3.6×103cfu/g和真菌数7.1×107 cfu/g,细菌数为3.3×107cfu/g。2.以饲料玉米为原料,制作绿叶汁发酵液,并测定期稳定期时间;发现乳酸菌在发酵24小时后达到稳定期,菌落数为2.49×107cfu/g。采用已制作绿叶汁发酵液(添加浓度为1.0%、1.5%、2.0%)做青贮添加剂,在实验室条件下贮藏60d并与传统青贮工艺(添加NaCl浓度为1.0%、3.0%)做比较。测定其青贮品质(包括微生物群落结构、pH值、粗蛋白、干物质、纤维素含量,有机酸含量)及体外消化率,并与传统青贮工艺做比较,并用生物统计学方法对数据结果进行分析。结果显示添加绿叶汁发酵液可以明显改善青贮品质,乳酸菌数量显著上升,平均增加两个数量级(102),pH值显著降低(经过青贮后均降至5.0以下,添加绿叶汁发酵液可降至4.0以下),干物质、粗蛋白及有机酸含量均有显著性增加(p<0.05)。经体外消化实验可知,添加绿叶汁发酵液与对照相比,可显著提高青贮饲料消化率:经处理后,青贮饲料的干物质消化率、粗蛋白消化率、纤维素消化率均与对照组有显著性差异。3.本实验旨在从饲料玉米中筛选适合做青贮饲料添加剂的高效乳酸菌。用MRS+CaCO3固体培养基筛选乳酸菌,经形态学和生理生化试验进行初步鉴定,测定其产酸效率;挑选出12株产酸率强的乳酸菌进行耐盐和耐酸能力的测定,并对其进行16SrDNA鉴定。从饲料玉米中共分离得到44株乳酸菌,挑选出的12株产酸能力强的菌株经生理生化试验鉴定分别属于明串珠菌属、乳杆菌属和肠球菌属,且12株菌株都具有良好的耐盐、耐酸能力;经16SrDNA鉴定,测序后与国际核酸数据库GeneBank中提交的相类似物种的核酸序列进行BLAST比对,确定实验菌株与其最近缘种的同源性来判断物种的归属,最后得出:A4、B9、B11、B12和B14为植物乳杆菌;A1、A2、A7、A11和B8为肠膜明串珠菌葡聚糖亚种;A8和A9为兼性肠球菌。经过理化鉴定及16SrDNA鉴定后可知,本实验从饲料玉米中筛选出3株具有较强产酸能力的乳酸菌,可进一步研发成青贮饲料添加剂。
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