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目的: 研究类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞的变化及miR-206的表达水平，分析miR-206与KLF4（Th17细胞重要转录因子）及Th17细胞的关系，初步探讨影响RA患者PBMC中Th17细胞比例变化的因素。 方法: 1.30例RA患者及21例健康对照者外周血标本取自苏州市中医院。分离RA患者及健康对照者PBMC，在体外培养体系中加入PMA、Ionomycin和莫能霉素，培养5h后，分别用FITC标记抗人CD3 mAb、PE-CY5标记抗人CD8 mAb两种荧光抗体同时标记，细胞破膜后再用PE标记抗人IL-17A mAb进行染色。采用流式细胞术(flowcytometer, FCM)检测CD3+CD8IL-17+(Th17)细胞的比例。 2.通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RA患者与健康对照者PBMC中Th17细胞特异性转录因子RORC mRNA的表达情况。 3.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测RA患者血清中抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的水平，免疫比浊法检测RA患者血清中RF因子含量。分别分析患者抗CCP抗体、RF与Th17细胞比例之间的相关性。 4.分离RA患者组和健康对照组血浆，ELISA方法检测血浆中IL-1β、IL-6和IL-23的水平，比较这三种细胞因子在RA患者组和健康对照组之间的差异。 5.通过qRT-PCR方法检测RA患者组与健康对照组PBMC中miR-206的表达情况，比较其在两组标本中的表达差异。 6.通过qRT-PCR检测RA患者组与健康对照组PBMC中KLF4mRNA的表达情况。分析KLF4 mRNA与miR-206、KLF4 mRNA与Th17细胞比例，以及miR-206与Th17细胞比例的相关性。 结果: 1.对FCM检测结果分析显示，与健康对照组相比，RA患者组Th17细胞的比例明显升高（0.65±0.41％ vs2.02±1.05％，p＜0.001）。 2.qRT-PCR扩增结果显示，RA患者组PBMC中RORC mRNA表达水平明显高于健康对照组(p＜0.01)。 3.分别分析抗CCP抗体、RF因子与Th17细胞比例的相关性，发现抗CCP抗体与Th17细胞比例呈现正相关关系(r=0.7492，p＜0.001)，而RF因子与Th17细胞比例之间无显著相关性(r=0.1728，p＞0.05)。 4.ELISA检测RA组和健康对照组血浆中IL-1β（6.58±3.22pg/ml vs4.25±2.60pg/ml）、 IL-6(34.00±22.02pg/ml vs12.62±9.83pg/ml)、IL-23(99.74±38.67pg/ml vs65.22±36.29pg/ml)浓度，结果显示这三种细胞因子在RA组血浆中的含量明显高于健康对照组(p＜0.01，p＜0.001，p＜0.01)。 5.对RA组和健康对照组PBMC中miR-206进行qRT-PCR检测，结果显示RA组PBMC中miR-206明显低于健康对照组(p＜0.005)。 6.qRT-PCR结果显示，RA组PBMC中KLF4 mRNA表达显著高于健康对照组(p＜0.05)，KLF4 mRNA与miR-206之间呈现负相关(r=-0.7626，p＜0.001)，与Th17细胞比例显著正相关(r=0.5147，p＜0.05)，进一步分析发现，miR-206与Th17细胞比例呈负相关(r=-0.7552，p＜0.001)。 结论: 1.RA患者PBMC中Th17细胞比例明显上升，其特异性转录因子RORC mRNA高表达，血浆中IL-1β、IL-6和IL-23水平显著高于健康对照组，并且外周血中抗CCP抗体与Th17细胞的比例呈现正相关关系。结果提示RA患者外周血中Th17细胞异常增加，并且与疾病程度密切相关。 2.RA患者PBMC中miR-206表达水平明显低下，其特异性靶基因KLF4的表达明显增加，miR-206与KLF4呈现负相关，并且miR-206与Th17细胞比例呈现负相关。提示RA患者PBMC中miR-206的变化可上调KLF4的表达，进而增加Th17细胞的比例。初步揭示了miR-206在RA发病机制中的重要调控作用。