宫颈脱落细胞中HPV感染与Beclin1蛋白表达的实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:lhm0510
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目的:应用免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)的方法检测子宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况,同时检测自噬基因Beclin1的表达水平及研究其相关性。为经济欠发达地区的子宫颈癌HPV筛查提供操作简单、费用低廉的HPV检测方法,同时补充新的有效的辅助筛查指标。方法:1500例病例来源于山西医学科学院山西大医院妇产科门诊就诊者及收住院患者,收集时间为2014年5月至11月;患者年龄范围为21-65岁,且既往均无宫颈病变史,首先从子宫颈移行带区刷取1份脱落细胞样本,进行液基薄层细胞学(Liquid thin-layer cytology test,LCT)检测,再从宫颈管处刷取1份宫颈分泌物标本进行杂交捕获第二代(HC II)法检测HPV感染。再利用液基薄层细胞学检测后的样本残液,进行免疫细胞化学法检测HPV感染情况;同时检测Beclin1的蛋白表达水平,对所有细胞学检查结果为不明确意义的非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及以上患者行阴道镜活检。详细记录以上各组受试者的检查结果。将以上各种检测结果核对后录入SPSS软件进行统计学分析比较,验证ICC法检测HPV感染情况及Beclin1蛋白表达这一辅助指标的临床应用价值。结果:1.1500例患者中,LCT异常者210例(14.0%),HC II法检测HPV感染者190例(12.7%),LCT异常者中用HC II法检测HPV感染者140例(66.7%),ICC法检测HPV感染者95例(45.2%),两种检测方法应用卡方检验(c2=85.95,P<0.05);灵敏度:47.4%;特异度:75.0%。2.正常子宫颈上皮,子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasis CIN)I级,子宫颈上皮内瘤变II-III级的子宫颈管脱落细胞中Beclinl蛋白阳性表达率分别为56.0%(56/100例)、49.1%(28/57例)、20.0%(3/15例)。两个独立样本卡方检验显示正常子宫颈与CIN I级的子宫颈脱落细胞中Beclinl的表达无显著性差异(c2=0.690,P>0.05);而正常子宫颈、子宫颈上皮内瘤变I级与子宫颈上皮内瘤变II-III级分别比较,则Beclinl蛋白表达差异有显著性(c2=6.765,P=0.009;c2=4.108,P=0.043)。3.HPV感染与Beclin1蛋白表达的关系,卡方检验结果显示:c2=20.198,P<0.05,实验结果表明:总体卡方检验有统计学差异,且随着HPV病毒负荷量值增加,Beclin 1蛋白表达呈下降趋势。结论:应用免疫细胞化学的方法检测宫颈脱落细胞中HPV感染情况,可作为农村地区宫颈癌筛查中HPV检测方法的选择,该检测方法敏感度近50.0%,特异度达75.0%;并且能够通过一份样本的检测,获取细胞学检测和HPV病毒感染两项信息,对于经济欠发达地区的宫颈癌筛查有一定的应用价值。2.宫颈癌癌前病变中,高级别病变(CIN II-III)患者宫颈脱落细胞中存在Beclinl表达缺失和下调,进一步证实了Beclinl的表达缺失与宫颈癌的发生有关,在宫颈癌的筛查中可作为备选的辅助指标。3.随HPV感染程度的增加Beclin1蛋白表达呈下降趋势,提示自噬功能的降低可能是HPV感染引起宫颈癌的机制之一。
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