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高效液相色谱(HPLC)被认为是迄今为止人类已经掌握的对复杂混合物分离能力最有效的手段之一;而荧光检测则被认为是最灵敏的检测手段之一。两者的有机结合,可以满足人们由常规及痕量分析向超痕量分析的要求。然而现实中大多数的物质不发荧光或荧光较弱,采用化学衍生法成为行之有效的途径。本文利用荧光标记技术使本身不发荧光的化合物(如脂肪酸、脂肪胺等)转化成发射荧光的衍生物,从而实现高灵敏荧光检测。本文重点研究了以苯并吖啶酮和2-(1-芘基)苯并咪唑为母体三种荧光标记试剂的合成和表征,考察了荧光标记试剂的光谱性质,优化了衍生反应条件、色谱分离条件,并将建立的方法应用于不同实际样品的分析中。具体工作内容如下:第一章:简述高效液相色谱的发展及其基础知识,介绍荧光原理及荧光标记法,分析总结荧光试剂衍生法的研究概况,并综述荧光标记试剂在羧酸类和胺类化合物的高效液相色谱分析中的应用。第二章:三种荧光标记试剂:苯并吖啶酮-5-乙基对甲苯磺酸酯、2-(5-苯并吖啶酮)-乙酸和2-(2-(1-芘基)-苯并咪唑)-乙基-对甲苯磺酸酯的设计合成、结构表征和光谱性质研究。第三章:两种荧光标记试剂BAETS和PBITS用于脂肪酸的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立脂肪酸的柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法,并将方法应用于木耳、狼毒根实际样品的测定。结果表明,衍生反应条件温和,衍生产率高,该方法的线性范围宽,重现性好,灵敏度高。第四章:荧光标记试剂PBITS用于胆汁酸的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立了胆汁酸的柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法,并将方法应用于血清样品的测定,实现了胆汁酸的高灵敏检测。第五章:新型荧光标记试剂BAAA用于脂肪胺的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立了荧光标记液相色谱分析法,实现了脂肪胺类标记,采用十二种脂肪胺的BAAA柱前衍生荧光检测法实现了水样中脂肪胺的测定。