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天然的蛋白酶抑制剂是对蛋白水解酶有抑制活性的一类小分子蛋白质,广泛存在于植物、动物、微生物中。通过与蛋白酶结合形成蛋白酶-抑制剂复合物,抑制蛋白酶的活性。目前关于植物蛋白酶抑制剂的研究,主要集中在抗虫作用方面,有关蛋白酶抑制剂生理功能的研究甚少。龙葵蛋白酶抑制剂Ⅱ(SolanumAmercianumproteinaseinhibitorsⅡ,SaPINⅡ)为丝氨酸型蛋白酶抑制剂,具有胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制剂活性。本论文研究SaPINⅡ在龙葵花中的时空表达规律。Northernblot和Westernblot结果显示,SaPINⅡ在龙葵幼花时期表达量最高,随着龙葵花的发育表达量逐渐降低,受精后表达量达到最低,幼果时期具有与幼花时期相似的表达量。胰蛋白酶活性分析得到相似的结果,说明蛋白酶抑制剂Ⅱ在龙葵花中的表达与龙葵花的发育有关。通过免疫组织化学分析,将SaPIN2a蛋白定位在龙葵花的珠心组织以及维管束中。随着龙葵花的发育,SaPIN2a蛋白在这些组织中表达分布也不同。TUNEL分析显示,这些组织在龙葵花发育过程中发生程序死亡,且程序死亡的部位与SaPIN2a蛋白在龙葵花中的分布呈负相关。提示SaPINⅡ可能与龙葵花发育中珠心组织的细胞程序死亡有关。推测其可能通过调控胰蛋白酶或胰糜蛋白酶的活性,参与珠心组织的细胞程序死亡的调控,在龙葵花的发育过程中发挥生理功能。