田间“碧秀”苦瓜带芽茎段的离体繁殖

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试验以苦瓜品种“碧秀”的田间植株茎段为材料,于2008年3月种植在四川农业大学蔬菜系试验田,该年5月开始取材实验。研究了取材时间、激素种类和浓度及各种添加物质对污染率、出芽率和增值倍数的影响。对比了0.1%升汞,1%次氯酸钠2种消毒剂不同时间的消毒效果及蔗糖、氨苄青霉素和羧苄青霉素加入培养基后的预培养结果。不同分化情况外植体的内源激素含量。以不同浓度的IBA对分化出的不定芽进行生根诱导试验。试验研究结果如下:(1)取材时间在5月的外植体污染率显著低于6-8月取材的外植体。(2)0.1%升汞消毒效果明显好于2%次氯酸钠,且最佳消毒时间为6min。(3)加入抗生素的预培养可以提高存活率,但在一定程度上降低了分化率。(4)6-BA和IBA对带芽茎段不定芽的分化和形成有很大影响,NAA和IAA效果不明显。MS+6-BA4.0 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1为最利于分化的激素组合,分化率为43.33%。BA浓度过高(≥6.0 mg·L-1)或过低(< 2.0 mg·L-1)时都不利于分化。(5)适当浓度硝酸银对芽的分化具有明显促进作用,硝酸银浓度在1-2mg.L-1时都能显著提高分化出芽数,但其浓度大于1 mg.L-1就会阻碍芽的进一步生长。(6)赤霉素在1-3 mg.L-1时都能促进芽的伸长,但3 mg.L-1的赤霉素加入容易造成芽的徒长不利于成苗。.(7) 6-BA4.0 mg·L-1+IBA0.2mg·L-1+AgNO3 1mg·L-1+GA32 mg·L-1配方的增殖倍数达到4.75。(8)将单个芽切下转入无细胞分裂素的培养基中培养,结果表明没有细胞分裂素而仅加入IBA时完全不能促进不定芽的伸长,并且有愈伤化的情况出现。(9)在1/2MS培养基+20g/L蔗糖+0.5 mg·L-1KT培养基中添加不同浓度的IBA进行生根诱导试验,发现添加0.4 mg·L-1的IBA生根率达到70%平均根数8条且生长正常,硝酸银对诱导根的发生无促进作用。(10)内源激素IAA/ZT比值1.6时为芽分化的最适比值,分化率较高且芽能够正常生长,IAA/ZT比值过低分化芽过度生长不良,过高无不定芽发生,只有愈伤组织形成。上述研究结果将为碧秀苦瓜快速繁殖体系建立提供依据。也将为苦瓜的花药离体培养和其他育种工作提供参考。
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