【摘 要】
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目的: 我们的前期研究显示腺病毒介导的CD/5-FC(胞嘧啶脱氨酶/5氟胞嘧啶)系统对卵巢癌有抑制作用。为增强该系统对卵巢癌的靶向性,本课题拟构建复制缺陷型腺病毒载体,用肿瘤特
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目的: 我们的前期研究显示腺病毒介导的CD/5-FC(胞嘧啶脱氨酶/5氟胞嘧啶)系统对卵巢癌有抑制作用。为增强该系统对卵巢癌的靶向性,本课题拟构建复制缺陷型腺病毒载体,用肿瘤特异的人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控胞嘧啶脱氨酶(Cytosine deaminase,CD)基因,将重组腺病毒转染至人卵巢癌细胞株与人胚肺成纤维细胞,观察病毒对细胞的杀伤作用,为卵巢癌的靶向性自杀基因治疗作初步探讨。 方法: 1.酶切质粒pUC19-CD后回收得到CD基因片段,以同样的内切酶酶切质粒pSU-Tp并回收载体片段,将回收的两片段连接,得到穿梭质粒pSU-Tp-CD; 2.将穿梭质粒pSU-Tp-CD及腺病毒骨架质粒pBHGE3共转染293细胞,
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