外源性硫化氢后处理经线粒体对离体鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:moxiaomi521
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目的: 探讨外源性硫化氢供体——NaHS后处理对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,I/R)的保护作用,及其保护作用与线粒体通透性转换(mitochondrial permeability transition,MPT)的关系。   方法: 56只Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为7组:正常对照组(CON)、缺血再灌注组(IR)、NaHS 1μmol/L后处理组(SP1)、NaHS 10μmol/L后处理组(SP2)、NaHS 100μmol/L后处理组(SP3)、5μmol/L环孢菌素A组(CsA组)、25mg/kgPAG组(PAG组),每组8只。CON组以95% O2和5% CO2混合气体饱和的K-H缓冲液(Krebs-Henseleit,K-H)恒温(37℃)持续灌注110min;IR组37℃平衡灌注20min后,全心停灌30min,K-H液再灌60min;硫氢化钠后处理组,在全心停灌30min后,再灌注开始时给予含不同浓度硫氢化钠的K-H液灌注10min,然后再灌注50min;CsA组于再灌注开始时给予含5μmol/L MPT抑制剂环孢菌素A的K-H液灌注10min,然后再灌注50min;PAG组在开胸取心脏前半小时腹腔注射25mg/kg胱硫醚-γ-裂解酶(cystanthionine-γ-lysase,CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸(L-Propargylglycine,PAG),离体心脏37℃平衡灌注20min后,全心停灌30min,K-H液再灌60min。未给予PAG的各组大鼠在开胸前半小时腹腔注射等量生理盐水。通过UV22101紫外分光光度计(Shimadazu公司,日本)检测线粒体的光密度在520nm波长处的变化测定线粒体通透性转换的变化,持续观察11min并记录数值。Western blot检测线粒体和胞浆细胞色素C(Cyto C)的释放,心肌组织石蜡切片HE染色。   结果: 缺血再灌注组(IR)诱发MPT,线粒体细胞色素C释放增多,胞浆细胞色素C含量增加(vs CON组,P<0.05)。硫氢化钠后处理组MPT不明显,线粒体细胞色素C释放不多,胞浆细胞色素C增加不明显(vs IR组,P<0.05),不同浓度组间比较差异无显著性(P>0.05)。PAG组诱发MPT,线粒体细胞色素C释放增多,胞浆细胞色素C含量增加(vs CON组,P<0.05),类似IR组。CsA组能阻断MPT,线粒体细胞色素C释放较少(vs IR组,P<0.05)。   结论: 外源性硫化氢后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,可抑制缺血/再灌注损伤大鼠心肌的MPT,减轻心肌细胞结构损伤和线粒体Cyto C的释放。
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