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树突状细胞(Dendritic cells，DCs)是机体最为重要的抗原提呈细胞(Antigen presenting cell，APC)。DCs对抗原的交叉提呈是指外源性抗原被DCs摄取和加工后，与MHCⅠ类分子结合形成CD8+特异性抗原肽-MHCⅠ类分子复合物的过程，可使T细胞分化为CD8+特异性细胞毒T细胞(Cytotoxic Tlymphocyte，CTL)。甘露糖受体(Mannose receptor, MR)是DCs表面重要的的模式识别受体(Pattern recognition receptor, PRR)，DCs对可溶性抗原的交叉提呈依赖于MR介导的抗原内吞及MR的泛素化修饰。但迄今为止，泛素化作用在DCs对抗原的交叉提呈中的研究尚少，为此，本课题以C57BL/6小鼠骨髓体外诱导的BM-DCs为研究对象，鸡卵白蛋白(Ovalbumin，OVA)为模式抗原，先通过Western blot验证负载抗原OVA后DCs胞内蛋白的泛素化水平，然后通过流式细胞术检测Thalidomide和PYR-41处理后DCs表面交叉提呈产物SIINFEKL-H2kb的产生;其次，使用激光共聚焦显微镜结合流式细胞术观察细胞表面Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)的表达变化后，进一步观察接头蛋白MyD88在胞质中的转位。通过免疫印迹检测Thalidomide和PYR-41是否影响NF-κB信号通路;同时也通过激光共聚焦显微镜观察了吞噬抗原后p97、Sec61等在DCs中的分布。最后通过BrdU细胞增殖实验、ELISA以及ELISPOT检测其对DCs交叉致敏的影响。 结果显示:(1)负载抗原OVA后，DCs胞内蛋白的泛素化水平明显上升;(2)Thalidomide和PYR-41预处理显著降低SIINFEKL-H2kb的产生。(3)LPS能引起DCs表面TLR4内吞并定位于早期内体，而Thalidomide和PYR-41能减少TLR4、MyD88的内体转位。(4)Thalidomide和PYR-41抑制NF-κB信号通路p65及IκBα磷酸化激活。(5)Thalidomide和PYR-41明显减少p97、Sec61从内质网到早期内体的转位。(6)Thalidomide和PYR-41预处理DCs，可致DCs介导的T细胞增殖和极化能力减弱。 结论:Thalidomide和PYR-41能抑制LPS诱导的NF-κB信号的激活，也抑制了p97、Sec61等到早期内体的转位，从而影响其交叉提呈及交叉致敏能力。