目的： 研究异烟肼(Isoniazid，INH)和利福平(Rifampicin，RFP)对大鼠成骨细胞(osteoblast，OB)增殖、碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase，ALP)活性和矿化能力的影响。 方法： 一、体外大鼠OB的分离及原代培养 取新生SD大鼠颅骨，采用多次酶消化法分离OB，进行原代培养；通过相差显微镜下形态学观察、Gomori氏钙钴法ALP染色、茜素红钙结节染色对OB进行鉴定：MTT法测定细胞增殖，绘制生长曲线。 二、利福平和异烟肼对成骨细胞影响的研究 采用2-4继代OB进行实验。(1)剂量分组：实验分为对照组(不加药物)，INH各浓度组(100、80、50、25、10ug/ml)，RFP各浓度组(100、10、5、2.5、1ug/ml)，INH+RFP组(浓度分别为50ug/ml和2.5ug/ml)。(2)利福平和异烟肼对OB增殖影响：待细胞贴壁后，换加药培养基，作用72h后测定细胞MTT(OD)(3)利福平和异烟肼对成骨细胞ALP活性的影响：待细胞贴壁后，换加药培养基，作用72h后测定细胞内ALP活性和蛋白含量(4)利福平和异烟肼对OB矿化能力的影响：待细胞贴壁后，换加药培养基，培养18天，茜素红染色，镜下计数各组矿化结节。 结果： 一、体外大鼠OB的分离及原代培养 分离所得的细胞具有典型的OB形态学特征，ALP改良Gomori氏钙钴法细胞化学染色大部分细胞胞浆可见棕褐色阳性颗粒，并可在体外形成矿化结节，茜素红细胞化学染色法呈现红色反应，鉴定为OB，且纯度较高，功能活跃。生长增殖情况可分为潜伏期、对数生长期、平台期及衰退期，符合细胞的生长规律。 二、利福平和异烟肼对成骨细胞影响的研究 (1)INH对OB的影响：与对照组比较，INH各浓度组对大鼠OB的增殖无明显抑制作用，在50ug/ml及以下浓度时大鼠OB的ALP活性和矿化能力无明显下降，80ug/ml及以上浓度时即有显著下降(P＜0.05)：(2)利福平对OB的影响：RFP在5ug/ml及以上浓度时即抑制大鼠OB的增殖、使ALP活性及矿化能力显著降低(P＜0.05)，在2.5ug/ml及以下浓度时对大鼠OB的增殖、ALP活性和矿化能力无明显影响(3)INH+RFP对OB的影响：当INH和RFP(浓度各为50ug/ml和2.5ug/ml)联合应用时，在MTT(OD)值、ALP活性及矿化结节计数上与对照组相比均无显著性差异，P＞0.05。 结论： 一、INH各浓度组对大鼠OB的增殖无明显抑制作用，在50ug/ml及以下浓度时大鼠OB的ALP活性和矿化能力无明显下降，80ug/ml及以上浓度时即有显著下降(P＜0.05)； 二、RFP在5ug/ml及以上浓度时即抑制大鼠OB的增殖、使ALP活性及矿化能力显著下降(P＜0.05)，在2.5ug/ml及以下浓度时对大鼠OB的增殖、ALP活性和矿化能力均无明显影响； 三、当INH+RFP(浓度各为50ug/ml和2.5ug/ml)联合应用时对大鼠OB的增殖、ALP活性及矿化能力均无明显影响； 四、在治疗骨结核时，局部大量使用抗结核药物对成骨细胞的增殖和功能会有抑制作用，可能会影响植骨融合，延长融合时间甚至导致不愈合，故应严格控制使用的剂量； 五、同时在对成骨细胞无明显抑制作用的浓度下两药联合应用并不增加抑制作用，故局部可两药合用增加抗结核作用而并不增加对骨融合的影响。