产纤维素酶菌群的筛选及其酶学特性研究

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:hujun_xiao
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通过好氧、厌氧和兼性厌氧三种不同培养条件的初筛和发酵复筛,在兼性厌氧条件下获得了三组可以快速、高效降解滤纸的复合菌群,其中MO的CMCase酶活最高达1.36IU。 对MO菌群纤维素酶酶学特性的研究发现:酶最适反应温度为60℃,最适pH值为7.0,且在60℃以下和pH3-8范围内具有良好的热稳定性和pH稳定性;钴、锌、铜等金属离子对纤维素酶活有显著的抑制作用,最高可达47%,钠和钾离子有激活作用,酶活分别提高7%和2%。在最适反应条件下,纤维素酶的最高CMCase活性可达2.13IU(蛋白胨为氮源)。微晶纤维素、发酵料和粉碎甜高粱秆作为碳源能不同程度的提高产酶,而CMC、粉碎玉米秆和酒糟对产酶有显著抑制作用。以酵母粉和牛肉膏对产酶具有极大的激活作用。分别是蛋白胨产酶量的2.42倍和2.37倍,而尿素、氯化氨和硫酸氨等无机氮源不利于产酶。 通过研究菌群内部不同生长阶段pH、酶活和失重率的动态变化及其相互关系,初步了解了菌群内部不同功能菌株在不同生长阶段的主导地位的变化。非变性凝胶电泳对酶谱分析共发现了七条活性酶谱条带。DGGE分析初步揭示了降解周期中菌群组成变化。 利用纤维素选择培养基分离得到了三株可培养的纤维素降解菌,16SrDNA序列分析表明它们分别与Ureibacillus thermosphaericus、Brevibacillus borstelensis和Bacillus sp.50LAy-3的亲缘关系最近,序列相似性分别达到99%、100%和99%。
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