β-溶血无乳链球菌(Streptococcus agalactiae),也称为B组链球菌(Group B streptococci,GBS),是健康成年人下消化道和阴道菌群中最常见的共生生物之一,属于条件致病菌。目前抗生素仍然是应对无乳链球菌感染的主要方式,青霉素是治疗GBS感染的一线抗生素,大环内酯类是推荐的二线药物。但是,近些年无乳链球菌分离株的抗生素敏感性分析表明,无乳链球菌对包括青霉素在内的多种抗生素的敏感性降低或者完全耐药。因此,GBS耐药菌株的出现对全球人类健康构成了越来越大的威害,这提醒我们应该寻找新的治疗方案用以替代或补充抗生素治疗。噬菌体裂解酶是一种由噬菌体基因组所编码的新型抗菌分子,其杀菌机制是通过水解细胞壁肽聚糖从而使细菌裂解死亡。革兰氏阳性菌裂解酶通常包括位于N端的酶活性结构域(EAD)和位于C端的细胞壁结合结构域(CBD)。裂解酶通常利用CBD靶向细菌细胞壁的特定部位,然后EAD通过破坏细菌肽聚糖的连键发挥杀菌作用,从而使细菌细胞裂解死亡。本研究通过融合来自Ply GBS裂解酶的酶活性结构域(GBS180)和来自Ply V12裂解酶细胞壁结合结构域(V12CBD)构建了嵌合裂解酶Cly V,并对其酶学性质以及对无乳链球菌在体外、体内的杀菌活性进行了表征和评估。平板裂解分析结合裂解动力学分析表明Cly V对多种链球菌均表现出了比其亲本裂解酶GBS180更高的杀菌活性。生化特性分析结果表明,Cly V在p H 7至p H 10之间具有活性,最适p H为9,并且在Na Cl浓度<500 m M时均具有稳定的杀菌活性。我们进一步通过建立无乳链球菌感染的小鼠模型评价了Cly V在体内的保护效果。试验结果表明单次腹腔注射0.1 mg/小鼠Cly V可以起到100%的保护效果。相比较而言,接受单剂量0.1 mg/小鼠GBS180的组中仅有29%的小鼠存活。而且,高剂量0.8 mg/小鼠Cly V对小鼠的活力以及存活率未观察到不良影响。虽然Cly V的药代动力学以及成药性等仍需要研究,但本研究初步展示出的强大杀菌作用表明Cly V具有用于无乳链球菌感染治疗的潜力。