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随着药物基因组学的发展,疾病个体化诊疗已应用于各个治疗领域,肿瘤的治疗也打破了传统的给药模式,实现了因人而异的个体化治疗。目前临床上使用较为广泛的抗肿瘤药为铂类与氟尿嘧啶类,由于其抗肿瘤谱广、交叉干扰性小,常将两种药物联合使用。大量临床研究表明,ERCC1、BRCA1基因mRNA表达水平与铂类药物疗效负相关,低表达的患者治疗效果较好；而TYMS基因mRNA表达水平则与氟尿嘧啶类药物疗效负相关,表达水平高的患者从化疗中获益较小。因此,患者进行铂类/氟尿嘧啶联合化疗前,进行ERCC1、BRCA1、TYMS基因mRNA表达水平的检测十分必要,可根据表达情况预测治疗效果,以指导制定合理的治疗方案。因此,为满足临床需求,本文在real time-PCR检测方法的基础上,设计高特异性、高灵敏度、高扩增效率的引物探针,且所设计引物探针不但可避免基因组DNA的扩增,还可检测到同一基因的不同转录本。此外,为提高检测结果的准确性,本文在检测体系中引入外源质控品,最终建立了ERCC1、BRCA1、TYMS基因]nRNA表达检测的方法。该方法经优化后,其稳定性及精密度均达到临床检测要求,可直接应用于临床样本检测,为患者提供可靠的用药指导。使用本文所建立方法对124例肿瘤样本进行检测,所选样本包括结直肠癌、胃癌、肺癌及乳腺癌四种肿瘤,样本中除新鲜手术切除组织外,还包含石蜡包埋样本。目的在于通过本实验结果,为后续实验样本的选择提供一定指导与参考。结果表明,ERCC1、 BRCA1、TYMS基因mRNA表达情况与患者性别及年龄之间无相关性,且石蜡包埋组织中的mRNA表达量普遍低于新鲜组织。此外,不同肿瘤组织中ERCC1、BRCA1、TYMS基因mRNA表达量也存在一定的差异。