云南杂草双生病毒的分子鉴定

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双生病毒在云南烟草、番茄和南瓜等多种作物上广泛发生,并已造成严重危害。由于双生病毒可能在杂草和农作物之间相互传染,为此我们对云南杂草上的的双生病毒开展了研究。 从云南赛葵、胜红蓟和稀硷上采集了39个双生病毒样品,部分序列测定表明,它们由不同病毒侵染。 Y160分离自赛葵,全序列测定表明,它与赛葵黄脉病毒(MYVV)的同源性最高,为82.2%。因此它是双生病毒新种,命名为云南赛葵黄脉病毒(Malvastrum yellow vein Yunnan virus,MYVYNV)。MYVYNV伴随有卫星DNA分子,它与MYVV DNAβ的序列同源性最高,为72.3%。序列比较发现MYVYNV可能是由MYVV和泰国番茄黄化曲叶病毒(TYLCTHV)重组形成的。构建了Y160 DNA-A和DNAβ的侵染性克隆。DNA-A单独接种以及DNA-A和DNAβ混合接种均可系统侵染本氏烟,DNAβ对于Y160 DNA-A的侵染不是必需的。DNAβ虽然不是症状的诱导因子,但伴随其辅助病毒DNA-A共同侵染时能加重病害症状,而且DNAβ可以显著增强DNA-A在植物中的积累。 从云南不同地区表现黄脉症状的赛葵上分离了20个DNAβ,序列比较发现,20个DNAβ分子均与MYVV DNAβ的序列同源性最高,达93.2-97.3%,说明这20个DNAβ均属于伴随MYVV的卫星DNA分子。20个DNAβ分子相互间的序列同源性高达93.0-99.8%,说明从云南不同地区赛葵上分离的20个MYVV DNAβ分子的序列变异相对较小。DNAβ的变异可能与病毒的寄主范围有关联,病毒的寄主范围越窄,伴随DNAβ的变异越小。 利用特异引物对采自云南各地的25个赛葵样品进行复合侵染检测。结果发现,25个样品中有13个能检测到MYVV和TYLCCNV的复合侵染,复合侵染率高达52%,说明田间自然发生的双生病毒复合侵染现象非常普遍。 测定了赛葵病毒样品Y193、Y194全基因组DNA-A。序列比较表明,Y193和Y194相互间的序列同源性高达98.7%,它们与TYLCCNV-To[Y25]的同源性最高,分别为88.0%和87.7%,进一步比较发现,Y193和Y194分离物可能是由TYLCCNV和另一病毒重组形成的。
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