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在临床治疗中,癌症严重影响着人类的生命健康,临床上的化疗药物对正常细胞具有毒副作用。抗癌肽以其广谱性、速效性和不易产生耐药性等特点而受到人们的广泛重视。本课题以前期工作获得的chensinin-1b为母肽,但其对MCF-7癌细胞的杀伤作用较低,因此利用不同碳链长度的脂肪酸对其序列中第17位赖氨酸残基进行修饰,从而设计得到具有不同疏水性的类似物,并对其抗癌活性和机制进行研究。首先,通过CCK-8细胞活力实验和LDH释放实验分析发现chensinin-1b脂肽的抗癌活性显著增强,且相比于MCF-10A细胞,对MCF-7细胞有一定的选择性,chensinin-1b、OA-C1b、LA-C1b和PA-C1b的IC50分别为:115.8±3.1μM、59.09±10.11μM、46.09±3.82μM、30.95±1.84μM。通过RP-HPLC分析脂肪酸碳链长度的增加能够增强chensinin-1b脂肽的疏水性,并且其抗癌活性也逐渐增强,这说明抗肿瘤活性与多肽的疏水性密切相关。通过Annexin V-FITC/PI实验、台盼蓝染色实验、MCF-7细胞对多肽的摄取实验来探究chensini-1b脂肽对MCF-7细胞的抗癌机理。实验结果表明,chensinin-1b脂肽无明显诱导Annexin V-FITC单阳性。同时,chensinin-1b、OA-C1b、LA-C1b和PA-C1b均能够被MCF-7细胞摄取并对细胞质膜的完整性有影响,说明chensinin-1b系列脂肽杀死人乳腺癌MCF-7细胞的机理是与细胞质膜的相互作用有关。为了研究chensini-1b脂肽抗癌的膜活性分子机制,使用流式细胞术检测MCF-7细胞对PI的摄取情况,结果表明OA-C1b、LA-C1b和PA-C1b均能够增强PI的摄取量,从而说明OA-C1b、LA-C1b和PA-C1b能够增强细胞质膜的通透性。通过扫描电子显微镜的方法对PA-C1b处理的MCF-7细胞质膜表面形貌进行成像,结果表明PA-C1b使MCF-7细胞质膜表面完整性被破坏、细胞质膜表面出现孔洞、细胞质膜崩解等特征。利用磷脂模拟肿瘤细胞质膜、真核细胞质膜的方法,通过色氨酸蓝移实验检测chensinin-1b、OA-C1b、LA-C1b和PA-C1b与脂质体的相互作用,结合CCK-8实验说明chensinin-1b脂肽对癌细胞膜具有一定的选择性。通过裸鼠荷瘤体内实验探究PA-C1b的体内抗肿瘤活性,给荷瘤小鼠定期注射PA-C1b,观察记录PA-C1b对肿瘤生长的抑制情况。结果表明,PA-C1b对小鼠体内肿瘤生长有抑制作用,PA-C1b具有体内抗肿瘤活性。最后,通过构建MSNs-NH2@Cy7-PA-C1b@FA-GO纳米靶向药物递送系统以提高chensinin-1b系列脂肽的稳定性和靶向性。使用叶酸作为肿瘤靶向表分子,使用氧化石墨烯作为药物递送系统刺激-响应控释的“分子开关”。结果表明,MSNs-NH2@Cy7-PA-C1b@FA-GO能够被肿瘤细胞摄取,且在808 nm的近红外照射下,Cy-7-PA-C1b能够被控制释放,在小鼠活体成像中具有一定的体内靶向性。