HIV-1转染RNA干扰靶向Atp6i基因防治大鼠股骨头坏死塌陷的实验研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:GAODAOQUAN
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目的:  研究慢病毒转染RNA干扰靶向Atp6i基因对大鼠激素性股骨头坏死股骨头塌陷的防治作用。  方法:  取体重为200g左右雄性SD大鼠52只,随机抽取42只,采用内毒素联合激素的方法造模,时间12周,随机抽取造模大鼠2只进行组织病理观察,确定造模成功。然后随机分为5组(空白A组、模型对照B组、阳性病毒C组、阴性病毒D组及密盖息E组),每组10只。A组和B组分别予生理盐水2ml/只肌肉注射,一周4次;C组予慢病毒siRNA阳性颗粒注入大鼠左侧股骨颈髓腔,骨蜡封填;D组予慢病毒siRNA阴性颗粒注入大鼠左侧股骨颈髓腔,骨蜡封填;E组予2U/kg密钙息肌肉注射,一周4次。2周后,取静脉血,离心取出上清,测血清中血钙、血磷和血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(Trap-5b)的含量,处死动物取出双侧股骨头,分别进行Atp6i基因荧光定量PCR检测和组织病理学观察,并计数破骨细胞及空骨陷窝率。  结果:  阳性病毒对大鼠血钙、血磷、Trap-5b及破骨细胞计数影响不明显,但能够明显减少手术侧股骨头的空骨陷窝率和Atp6i的表达,与密盖息组有显著性差异(P<0.01);对非手术侧股骨头的空骨陷窝率和Atp6i的表达影响不明显,与模型组及阴性病毒组无明显差异(P>0.05)。  结论:  慢病毒转染RNA干扰靶向Atp6i基因对手术侧股骨头破骨细胞Atp6i基因有明显的抑制作用,而对对侧股骨头的作用不明显;破骨细胞被抑制后大鼠股骨头病理下观察少见软骨下骨骺反凹及断裂,骨小梁结构粗细均匀排列规则,股骨头的生物力学性能增加,间接证明了破骨细胞在股骨头坏死塌陷中的作用;慢病毒转染RNA干扰靶向Atp6i基因对手术侧大鼠股骨头的塌陷有防治作用。
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