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目的:研究circPARP4的表达与肺腺癌的关系,并探讨circPARP4在肺腺癌发生发展中的作用。方法:(1)对支气管上皮细胞(BEAS-2B)、肺腺癌细胞(H1299)培养,分别取3个BEAS-2B和H1299细胞样本行RNA Seq测序,获取全部circRNAs序列,对序列进行分析,获取差异circRNAs表达谱。(2)将差异circRNAs表达谱的测序结果比对到circBase数据库中,选取在H1299细胞中显著下调的circRNA为目标circRNA。使用UCSC数据库进一步分析目标circRNA分子来源与结构。(3)采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测20例肺腺癌患者手术标本,比较每份标本癌组织和癌旁组织目标circRNA的表达差异;分析目标circRNA的表达水平与临床病理参数的关系。(4)使用RBPDB数据库对目标circRNA结合的蛋白质(RNA bingding protein,RBP)进行预测,利用TCGA数据库分析目标RBP在肺腺癌样本中总体表达情况及与患者预后的相关性。对目标circRNA下游靶基因行GO和KEGG pathway分析,推测目标circRNA可能涉及的生物功能和参与的下游通路。结果:(1)相较于BEAS-2B细胞,H1299细胞有差异表达的circRNAs 460个,其中上调的circRNAs 278个,下调的circRNAs 182个;差异表达的circRNAs在各条染色体上均有分布,并且87%的差异表达circRNAs来源于基因的外显子,其次来源于基因的重叠区。(2)目标circRNA(chr13:25051839-25052414-)来源于PARP4基因,命名为:circPARP4,在H1299细胞中显著表达下调(Fold change值为3,p值=0.033);PARP4基因是位于人类第13号染色体上,由34个外显子构成,circPARP4是由PARP4基因的第13、第14外显子加一段内含子转录反向成环而来,其长度为341nt。(2)相对于癌旁组织,circPARP4在肺腺癌组织中的表达量下降(p=0.0370)。肺腺癌组织circPARP4表达水平与年龄、性别、肿瘤直径大小及淋巴结转移无关,与TNM分期具有显著负相关(p=0.017),即TNM分期越晚,circPARP4表达量越低。(3)生物信息学分析发现circPARP4可以与16种RBPs结合,其中有4种蛋白(SFRS1、SNRPA、RBMX、ELAVL1)在肺腺癌标本中具有显著的差异表达上调,并且高表达SNRPA(p=0.020751)、ELAVL1(p=0.020129)蛋白的肺腺癌患者预后较低表达者更差。通过GO和KEGG pathway分析,发现circPARP4下游靶基因主要与mRNA加工、蛋白质泛素化、组成病毒核衣壳、蛋白质结合、蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性、RNA聚合酶Ⅱ转录辅助因子活性等基础生物学功能有关,还参与下游PI3K-Akt信号通路。结论:(1)circPARP4在肺腺癌细胞株和肺腺癌组织的表达量均显著降低,circPARP4的表达量与年龄、性别、肿瘤直径大小及淋巴结转移无关,与TNM分期显著负相关。(4)circPARP4与ELAVL1/SNRPA结合,可能调节下游PI3K-Akt信号通路,抑制肺腺癌的进展。