β-七叶皂苷钠对SSST大鼠脑水肿、血脑屏障及AQP-4的影响

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目的:研究大鼠上矢状窦中1/3及其回流静脉结扎(SSS+RV)后脑水肿、AQP-4及血脑屏障破坏程度三者之间的关系;并探讨β-七叶皂苷钠是否能通过调节SSS+RV后窦旁脑组织中AQP-4的表达而减轻脑水肿程度。方法:96只健康雄性SD大鼠,按照完全随机原则分为假手术组(ShamOperation,SO组)6只;上矢状窦中l/3及其回流静脉结扎组(SSS+RV组/SR组),SR组按处死时间点即结扎后6h、12h、24h、48h、72h分为5亚组,每个亚组6只;干预组60只分为生理盐水干预组(NS+SSS+RV组/NS组)和β-七叶皂苷钠干预组(SA+SSS+RV组/SA组),各组又细分为6h、12h、24h、48h、72h组5个亚组,每亚组6只。各组大鼠于相应时间点处死,处死前观察大鼠神经功能缺损程度,光镜下观察窦旁脑组织病理变化、干湿重法检测窦旁脑组织含水量、检测窦旁脑组织EB漏出量反映血-脑屏障通透性、免疫组化法检测AQP-4蛋白的表达。结果:1)SO组未出现神经功能缺损,而SR、NS组均于结扎SSS中1/3及其回流静脉后6h开始出现神经功能障碍,且随着时间的延长,神经功能缺损越严重,于24h神经功能评分最高,此后,神经功能评分逐渐降低,72h神经功能评分较24h明显降低;SA各亚组较SR、NS组神经功能缺损程度明显减轻,且差异具有统计学意义(P<0.05);2)SR组、NS组大鼠SSS+RV后6h,HE染色开始出现神经元水肿、变性、坏死,Nissl染色显示尼氏小体数量减少,二者均于24h时最明显,此后随时间延长神经元变性较前好转、尼氏体数量逐渐增加,与SR、NS组比较,SA组上述变化明显减轻;3)大鼠SSS+RV6h时,各组脑组织含水量开始增加(与SO组比较,P<0.05),并于结扎后24h达高峰,此后随时间延长逐渐降低,72h时脑组织含水量较24h明显减少;而予以生理盐水干预组(NS组),各时间点相应亚组脑组织含水量与SR组中对应亚组比较,无明显差异,给予β-七叶皂苷钠干预组(SA组)中,脑组织含水量则明显减少(P<0.05);4)大鼠SSS+RV6h时,各组AQP-4表达量开始增加(与SO组比较,P<0.05),于结扎后24h达高峰,随后其表达逐渐减少,72h时AQP-4含量较24h明显减少;而予以生理盐水干预组(NS组),各时间点相应亚组脑组织AQP-4蛋白含量与SR组中对应亚组比较,无明显差异,给予β-七叶皂苷钠干预组(SA组)中,AQP-4表达量则明显减低(P<0.05);5)大鼠SSS+RV6h时,各组窦旁脑组织EB漏出量开始增加(与SO组比较,P<0.05),并于结扎后24h窦旁脑组织EB含量最高,此后随时间延长逐渐减少,72h时EB含量较24h明显减少;而予以生理盐水干预组(NS组),各时间点相应亚组脑组织EB含量与SR组中对应亚组比较,无明显差异,给予β-七叶皂苷钠干预组(SA组)中,脑组织EB漏出量则明显减少(P<0.05);6)大鼠SSS+RV结扎后,脑含水量与EB含量呈显著正相关(r=0.796,p<0.01),脑含水量与AQP-4蛋白的表达呈显著正相关(r=0.773,p<0.01),且EB含量与AQP-4蛋白的表达也呈显著正相关(r=0.928,p<0.01)。结论:1)大鼠SSS中1/3及其回流静脉结扎后,脑水肿程度、AQP-4含量及血脑屏障破坏三者之间密切相关;2)β-七叶皂苷钠可通过下调脑组织中AQP-4的表达而减轻血脑屏障的破坏程度、减轻脑水肿程度。
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