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目的:肿瘤的转移是患者死亡的主要原因,肿瘤细胞发生转移是涉及多个步骤的过程,包括上皮间质转化、侵袭血管、通过血管迁移、外渗和在组织定植等,而上皮间质转化是肿瘤细胞发生转移的首要条件。因此,找到一种药物抑制肿瘤细胞上皮间质转化的发生,成为了近年来医学研究的热点。活血化瘀中药以其活血行气,破瘀消癥等功效,在恶性肿瘤的治疗上取得了很好的疗效,其中以莪术、三棱、斑蝥等为代表的中药,能够有效抑制肿瘤细胞生长,在临床中应用广泛。榄香烯是从中药莪术中提取出的有效成分,对肿瘤细胞具有抑制作用。本实验通过研究榄香烯对肿瘤细胞功能学变化及其蛋白水平的表达情况,证实榄香烯对肺癌细胞H1299、乳腺癌细胞MCF7和结肠癌细胞SW480的抑制作用,明确其抑制肿瘤细胞发生上皮间质转化的作用机制。材料与方法:人肺癌细胞系H1299、乳腺癌细胞系MCF7和肠癌细胞系SW480均来自中国医科大学病理实验教研室,榄香烯注射液购自大连金港制药有限公司(生产批号:1612071)。肺癌细胞H1299、肠癌细胞SW480和乳腺癌细胞MCF7分别进行体外培养,培养条件为5%CO2、37℃培养箱中,1-2天换液1次,细胞生长至80%-90%融合状态时,用浓度为0、20、40、60μg/mL榄香烯注射液作用于H1299、MCF7和SW480细胞,作用24小时后,分别采用克隆形成实验检测各组细胞增殖能力;transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力;Western blot实验检测上皮间充质转化(Epithelial-mesenchymal)相关蛋白,包括:E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子(Snail)、波形蛋白(Vimentin)、胞质紧密粘连蛋白1(ZO1)和紧密连接蛋白Occludin等蛋白的表达水平。采用SPSS 22.0软件(IBM,Armonk,NY,USA)进行统计分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1.随着榄香烯注射液处理浓度的升高,三种肿瘤细胞的集落形成数目明显减少,不同浓度榄香烯处理组与空白组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。空白组(0μg/ml)和药物处理组(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)H1299细胞集落形成数分别为90±5、46±5、29±5、15±5;MCF7细胞为135±5、78±5、60±5、40±5;SW480细胞为150±10、130±10、100±10、82±10。2.随着榄香烯注射液处理浓度的升高,三种肿瘤细胞的穿膜细胞数均明显下降,细胞的迁移和侵袭能力逐渐减弱。不同浓度榄香烯处理组与空白组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。空白组(0μg/ml)和药物处理组(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)H1299细胞穿膜数分别为120±10、75±10、43±5、20±5;MCF7细胞穿膜数分别为210±10、156±10、82±5、40±5;SW480细胞穿膜数为78±5、62±5、40±5、19±5。3.随着榄香烯注射液药物浓度的升高,EMT相关蛋白表达情况:E-cadherin、ZO1、Occludin蛋白表达水平升高;N-cadherin、Snail、Vimentin蛋白表达水平降低。结论:1.榄香烯可抑制H1299/MCF7/SW480细胞的增殖,并且随着药物浓度的增加,其抑制作用增强。2.榄香烯可抑制H1299/MCF7/SW480细胞的迁移能力,且具有浓度依赖性。3.榄香烯抑制H1299/MCF7/SW480细胞的迁移与侵袭可能是通过激活Snail表达,进而上调E-cadherin,下调N-cadherin的过程而实现的。