【摘 要】
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目的从基因表达调控层面探讨“扶阳固肺”盒灸法对健康人机体免疫的调节机制。方法采用随机对照研究,将20名健康志愿者随机分为盒灸组与空白对照组。盒灸组选取双侧肺俞、腰俞至神道的督脉段腧穴进行艾灸,每日艾灸一次,每穴3壮,10次为一个周期,总共干预一个周期。空白对照组不进行艾灸及任何干预。两组受试者在试验前、后分别空腹抽取2.5ml静脉血,进行转录组测序。将测序得到的差异表达基因进行GO功能与KEGG通
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目的从基因表达调控层面探讨“扶阳固肺”盒灸法对健康人机体免疫的调节机制。方法采用随机对照研究,将20名健康志愿者随机分为盒灸组与空白对照组。盒灸组选取双侧肺俞、腰俞至神道的督脉段腧穴进行艾灸,每日艾灸一次,每穴3壮,10次为一个周期,总共干预一个周期。空白对照组不进行艾灸及任何干预。两组受试者在试验前、后分别空腹抽取2.5ml静脉血,进行转录组测序。将测序得到的差异表达基因进行GO功能与KEGG通路富集分析;通过比对筛选出“扶阳固肺”盒灸法对健康人机体免疫具有调节作用的关键差异表达基因。结果1.差异表达基因GO功能注释与富集结果:盒灸组干预前后差异表达基因被划分为46个功能聚类、274条GO term;干预周期后盒灸组与空白对照组差异表达基因被划分为44个功能聚类、201条GO term。在功能注释中杀伤细胞、免疫反应过程、分子功能调节等可能与“扶阳固肺”盒灸法对健康人机体的免疫调节机制相关;在生物学过程中,差异表达基因主要集中在抗体依赖性细胞毒性、超敏反应的正调节、干扰素-γ介导的信号通路、Ig G受体活性等多种免疫功能上。2.差异表达基因KEGG通路富集分析:盒灸组干预前后共得到11条显著富集的KEGG Pathway,干预周期后盒灸组与空白对照组共得到10条显著富集的KEGG Pathway,两者共有的破骨细胞分化通路可能与“扶阳固肺”盒灸法对健康人机体的免疫调节机制有关。3.“扶阳固肺”盒灸法免疫调节机制的关键差异表达基因筛选:转录组测序筛选出IL1R1、FCGR1A、SOCS3、MALT1为本次试验的关键差异表达基因,通过实时荧光定量PCR验证,FCGR1A、SOCS3、MALT1在盒灸组干预前后及干预周期后盒灸组与空白对照组的基因表达量均有显著差异变化（P＜0.001）并与转录组测序上下调趋势一致;基因IL1R1干预前后表达量无显著变化,验证结果与RNA-seq测序结果有出入,故确定FCGR1A、SCOS3、MALT1三个基因为“扶阳固肺”盒灸法对健康人机体免疫调节的关键差异表达基因。结论“扶阳固肺”盒灸法能够调节健康人机体免疫,可能是通过上调FCGR1A、SOCS3、MALT1基因的表达来参与机体免疫调节。
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