TCF3对非小细胞肺癌A549细胞株生长和迁移的影响

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gengfu123456789
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目的:探讨TCF3 (Tcell factor 3)基因敲低对A549细胞的Wnt通路转录活性,细胞生长和迁移的影响。方法:通过转染SiRNA将A549细胞中的TCF3基因敲低作为实验组,同时设立仅常规培养的空白对照组和转染阴性SiRNA的阴性对照组。通过实时荧光定量PCR及Western blot明确3组细胞中TCF3的mRNA和蛋白表达量,通过TOPFlash/FOPFlash信号通路报告载体测定细胞Wnt通路转录活性,CCK-8检测A549细胞生长活力,流式细胞学技术分析A549细胞周期与细胞调亡情况,Transwell测定A549细胞迁移能力。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,实验组A549细胞TCF3的mRNA (0.17±0.02 VS 1.00±0.00, P=0.00; 0.17±0.02 VS 1.00±0.17, P=0.00)和蛋白水平(0.03±0.01 VS 0.15±0.02,P=-0.00;0.03±0.01 VS0.15±0.02,P=0.00)显著降低;TOPflash/FOPflash报告基因的比值降低(5.20±0.60 VS 10.30±0.90,P=-0.00;5.20±0.60 VS 10.70±0.40,P=-0.00);Wnt靶基因C-myc的蛋白表达量下降(0.27±0.02 VS0.75±0.04,P=0.00:0.27±0.02 VS 0.74±0.04,P=-0.00);细胞的增殖活性降低,细胞凋亡率增加(29.77±1.52 VS 14.59±1.99,P=-0.00;29.77±1.52VS 15.33±1.97,P=-0.00),细胞周期比例发生变化,G0/G1期细胞增多(71.98±0.51 VS 59.20±2.55,P=0.01;71.98±0.51 VS 58.06±3.25,P=-0.00),S期细胞减少(23.91±0.05 VS 30.87±1.80,P=0.00;23.91±0.05VS 32.87±3.90,P=-0.01);细胞穿膜数目明显减少(36.00±4.00 VS68.70±4.20,P=0.00;36.00±4.00 VS 67.00±8.70,P=0.00)。结论:1、敲低TCF3基因能引起A549细胞的Wnt通路转录活性明显降低,并使Wnt下游靶基因C-myc的表达下调,提示TCF3在非小细胞肺癌的Wnt通路中起转录激活的作用。2、TCF3可能通过调控Wnt通路下游靶基因而影响肺癌细胞的生长及迁移能力。
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