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目的: 白血病是当今世界上最常见的恶性肿瘤之一,严重的威胁了人类的健康和生命。目前我国白血病的发病率也正在持续上升。因此,白血病的治疗已成为当前备受关注的热点话题之一。尽管白血病的病因及其发病机制尚未完全阐明,但中药抗癌药物的研究成为近年来的研究热点。2-羟基-3-甲基蒽醌(2-hydroxy-3-methylanthraquinone)是从天然白花蛇舌草中提取的一种单体,对多种肿瘤,如:白血病、胃癌、黑色素瘤、胰腺癌、乳腺癌等有抑制其生长、浸润和转移的作用,并在癌症的预防和治疗方面具有较强的活性。本研究旨在探讨2-羟基-3-甲基蒽醌诱导白血病细胞U937凋亡的机制。为深入研究白花蛇舌草抗肿瘤机制提供实验基础。 方法: 1、采用Hoechst33258荧光染色观察U937细胞形态变化; 2、采用Annexin Ⅴ FITC/PI双染流式细胞仪分析U937细胞的凋亡情况; 3、采用Western blot技术检测磷酸化和非磷酸化ERK1/2,JNK1/2和p38MAPK蛋白的表达; 4、采用荧光分光光度计分析技术检测caspase-3活性。 结果: 1、Hoechst33258染色结果显示凋亡细胞的百分率随着2-羟基-3-甲基蒽醌浓度的升高而增加。 2、Annexin Ⅴ FITC/PI双染流式细胞仪检测U937细胞凋亡:凋亡百分率随着2-羟基-3-甲基蒽醌的浓度增加及作用时间的延长而升高。 3、Western blot分析结果显示随着2-羟基-3-甲基蒽醌作用时间逐渐延长,磷酸化p38MAPK蛋白的表达逐渐增强,磷酸化ERK1/2蛋白的表达水平逐渐下降,而磷酸化JNK1/2的表达不变。 4、荧光分光光度计分析结果显示随着2-羟基-3-甲基蒽醌的浓度增加及作用时间的延长,caspase-3活性逐渐增强。 结论: 2-羟基-3-甲基蒽醌能够诱导U937细胞凋亡,并具有时间和剂量依赖性,其作用机制与磷酸化p38MAPK蛋白表达上调、磷酸化ERK1/2蛋白表达下调及caspase-3活性增强有关。