【摘 要】
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目前辣(甜)椒利用不育系,恢复系,保持系三系配套方法生产一代杂种,因其纯度高,生产成本低,已成为辣(甜)椒杂种优势利用的重要途径.在利用CMS生产杂交种中,新的方法——分子标
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目前辣(甜)椒利用不育系,恢复系,保持系三系配套方法生产一代杂种,因其纯度高,生产成本低,已成为辣(甜)椒杂种优势利用的重要途径.在利用CMS生产杂交种中,新的方法——分子标记辅助育种技术显示出巨大的潜力.该研究针对制钟过程中,恢复系选育周期长,选育效率低及恢复源少的现状,以不育系与恢复系为材料,应用BSA法,寻找恢复基因的标记位点.为缩短恢复系选育周期,分离克隆恢复基因,并为将辣椒恢复基因转入甜椒,人工创造甜椒相应的恢复系奠定基础.通过上述方法得到如下结果:1、该研究采用336个10bp随机引物分析了辣椒不育系与恢复系基因组DNA池间的多态性,有37个引物的扩增产物在不育系和恢复系材料间呈多态性,经进一步的重复实验证明,只有引物S418能够产生稳定的多态性.其大小为1500bp左右.以S418为引物,对不育系和恢复系进行单株检测.在恢复系基因组DNA中均得到一条1500bp左右的特有标记,并能稳定出现.将此特异片段回收,制备探针.进一步的荧光原位杂交分析显示:S418<,900>在恢复系6条染色体上显示清楚的杂交信号,在不育系染色体中无杂交信号.据此认为,这一RAPD标记为低拷贝序列,可能与辣椒恢复基因相关.测序及转成SCAR标记工作正在进行中.2、该研究对RAPD技术的实验程序进行了研究,并对在应用RAPD技术中存在的一些问题和策略进行了讨论.
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