【摘 要】
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该实验采用SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,研究了脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα催化AMPA受体亚基GluR1丝氨酸磷酸化及起其相关机制,同时主要研究了CaMKⅡα特异性抑制剂、NMDA受体
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该实验采用SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,研究了脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα催化AMPA受体亚基GluR1丝氨酸磷酸化及起其相关机制,同时主要研究了CaMKⅡα特异性抑制剂、NMDA受体拮抗剂、VGCC通道拮抗剂等药物对其影响,进一步阐明了全脑缺血海马组织中钙超载和调节机制.1.脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα催化AMPA受体亚基GluR1 Ser831磷酸化.我们研究了脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα催化AMPA受体亚基GluR1 Ser831磷酸化.2.CaMKⅡα特异性抑制剂KN62,钙调素特异性抑制剂TFP对脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα催化AMPA受体亚基GluR1 Ser831磷酸化的影响.在缺血15分钟的时间点上和缺血15分钟复灌30分钟的时间点上,在缺血前20分钟分别通过腹腔或脑室注射KN62和TFP,结果显示结果显示KN62和TFP能抑制缺血和复灌诱导的粗膜部分的CaMKⅡα的自身磷酸化以及CaMKⅡα和GluR1结合水平,同时也降低GluR1 Ser831的磷酸化.3.NMDA受体特异性拮抗剂DEX,非NMDA受体特异性拮抗剂DNQX和电压依赖性Ca<2+>通道特异性拮抗剂MF对脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα催化AMPA受体亚基GluR1 Ser831磷酸化的影响.在缺血15分钟的时间点上和缺血15分钟复灌30分钟的时间点上,在缺血前20分钟分别通过腹腔注射DEX,DNQX和NIF,结果显示DEX能抑制脑缺血/复灌诱导的粗膜部分的CaMKⅡα的自身磷酸化以及CaMKⅡα和GluR1结合水平,同时也降低GluR1 Ser831的磷酸化.结论:脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα能够催化AMPA受体亚基GluR1 Ser831磷酸化.脑缺血/复灌诱导CaMKⅡα快速自身磷酸化,被激活CaMKⅡα转位到细胞膜上,结合并催化GluR1 Ser831磷酸化,进而导致AMPA受体的通道活性升高,增强突触功能.另外在脑缺血/复灌中通过NMDA受体的Ca<2+>内流能够影响到GluR1 Ser831磷酸化,进而调节AMPA受体的通道活性,其中自身磷酸化的CaMKⅡα作为中间的关键因素发挥重要作用,这可能是神经系统受体网络调节的一部分内容.
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