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目的:建立未成熟脑脑室周围白质软化(Periventricular leukomalacia,PVL)动物模型,经腹腔移植人脐带间充质干细胞(Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,HUcMSC),探讨HUcMSC在未成熟脑定向迁移以及对受损脑组织的神经保护作用。 方法:5日龄(P5d)新生大鼠40只随机分为迁移组和假手术组、HuMSCs移植组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组;每组各10只乳鼠。每组又根据处死注时间的不同随机分为生后1天、19天两个时间点。体外培养HUcMSC;假手术组只行血管分离,不结扎左侧颁总动脉也不放入缺氧舱内。迁移组、HUcMSC移植组和PBS对照组建立新生大鼠PVL(Periventricular Leucumalacia)动物模型。迁移组和假手术组每只实验鼠经腹腔给予Brdu标记的HuMSC1×107/0.05PBSml悬液注射入体内,24小时后(P6d)处死,BrdU免疫组化染色方法观察HUcMSC在实验鼠脑内的迁移;HUcMSC移植组和PBS对照组分别在造模后经腹腔注射第二代HUcMSC(1×107/0.05PBSml)以及0.05mlPBS无菌溶液,在第14d,应用7.0微型MRI(MicroMRI)扫描观察HUcMSC对病变区域修复程度,评估实验鼠远期神经行为学,MBP免疫组化疗法观察移植HUcMSC对髓鞘形成的影响,评估HUcMSC对早产儿PVL的神经保护作用。 结果:1、BrdU免疫组化染色显示移植HUcMSC后24小时,迁移组实验鼠脑白质内出现Brdu染色阳性细胞(2.10士0.99)较假手术组(0.90±0.74)多,存在统计学意义(P<0.05);2、移植HUcMSC组在干细胞干预后24小时应用MicroMRI扫描在T2W2上可见明显高信号,第14d在T2W2上未见异常信号;PBS对照组大鼠在PBS干预24小时后应用MicroMRI扫描,在T2W2上可见明显高信号,第14d在T1W1可见低信号,脑白质软化灶形成;3、第14d,HUcMSC移植组大鼠悬吊试验(3.40±0.966)、旷场试验(1.60±0.516)、拒俘反应(3.00±0.816)实验评分均较PBS对照组悬吊试验(1.8±0.789)、旷场试验(0.6±0.516)、拒俘反应(1.30±1.059)高,存在统计学意义(P<0.05);4、两周后移植HUcMSC组髓磷脂碱性蛋白(MBP)染色阳性细胞数(13.95±1.57)明显多于PBS对照组(10.22±1.02),存在统计学意义(P<0.05)。 结论:1、HUcMSC经腹腔移植可向病变部位定向迁移;2、HUcMSC干预后MBP标记细胞增彩,减轻髓鞘形成障碍;3、微型MRI扫描实验鼠PVL病变面积显著缩小;4、HUcMSC干预PVL后,动物远期运动功能改善。HUcMSC具有神经保护作用。