论文部分内容阅读
目的：体外培养小胶质N9细胞并观察其不同条件培养液（conditioned medium,CM）对乳腺癌MCF-7细胞生存率的影响，以探讨小胶质细胞在脑转移癌中的作用机制以及干扰素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）在诱导N9抗癌中的潜在价值。方法：1.混合培养N9细胞和MCF-7细胞，在倒置光学显微镜下观察细胞形态学的变化。2.采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、MCF-7细胞及其条件培养液MCF-7-CM刺激N9细胞获得不同组别的N9-CM；ELISA法检测N9-CM中肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）的表达，Griess法检测一氧化氮（nitric oxide，NO）生成。3.将N9-CM按不同浓度（10%、25%、50%、75%和100%）作用于MCF-7细胞，MTT法检测N9-CM对MCF-7细胞生存率的影响。4. IFN-γ激活N9，提取上清液作用于MCF-7细胞，观测MCF-7细胞生存率的变化。结果：1. MCF-7细胞与N9细胞共培养12h，N9细胞由静止态变为圆形或椭圆形，体积缩小的激活态，分布不再规则并有包绕MCF-7细胞的趋势。2. LPS、MCF-7细胞及其上清液均可以诱导N9细胞产生TNF-α、IL-17和NO。3.正常N9细胞组N9-CM于24h内抑制MCF-7细胞增殖，36-48h表现为促细胞增殖作用。MCF-7-CM组N9-CM浓度达50%-100%时对MCF-7细胞生长有抑制作用，且作用强度呈时间-浓度相关性。MCF-7细胞组不同浓度N9-CM主要呈抑制MCF-7细胞增殖的趋势。LPS组N9-CM整体呈抑制MCF-7细胞增殖的趋势。4. IFN-γ组N9-CM主要表现为促肿瘤趋势，且与上清浓度有相关性；MCF-7+IFN-γ组上清液则表现出明显的抗肿瘤活性；LPS+IFN-γ组，结果显示除高浓度（100%）上清液有显著的抗肿瘤作用外，其他浓度组呈促肿瘤趋势。结论：1.小胶质细胞可以被乳腺癌细胞激活并发挥肿瘤抑制作用。其作用强度与小胶质细胞分泌NO及细胞因子TNF-α和IL-17的浓度和作用时间呈正相关。2.本实验尚未发现IFN-γ在介导小胶质细胞抗肿瘤中的特殊价值。