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蔓越莓(Cranberry)作为一种低热量、高纤维、富含多种营养物质的水果,被誉为北美三大传统水果之一,其制品也正逐渐被引入中国市场。由于蔓越莓中含有大量植物活性物质,尤其是其独特的A型原花青素,能有效保持泌尿道的健康,近年来越来越受到人们的关注。本文以富含A型原花青素的蔓越莓浓缩物(CBC)为研究对象,以富含B型原花青素的葡萄籽提取物(GSE)作为对照品,对其进行了有关主要成分的分析鉴定、小鼠体内延缓衰老和调节氧化还原状态的功能,以及端粒保护作用的研究。得出以原花青素A2为主要生物活性物质的CBC能从调节体内氧化还原状态和端粒保护两方面发挥延缓衰老的作用,相比以(表)儿茶素和原花青素B2为主要生物活性物质的GSE,CBC在谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的调节、端粒保护方面的作用效果更加理想,提示CBC作为一种延缓衰老的功能性食品具有巨大潜力。详细研究内容和结果如下:1、主要成分含量分析采用GB法对CBC和GSE中的水分、灰分、脂肪、蛋白质、总黄酮、总原花青素、抗坏血酸和维生素E(以α-生育酚计)的含量进行检测。结果显示CBC与GSE中最主要的活性物质均为原花青素。CBC中原花青素含量为15.6g/kg,GSE中原花青素含量为309.0 g/kg。2、原花青素的组成分析与结构鉴定采用Q-Extractive组合型四极杆/轨道阱高分辨质谱法(QE)对CBC和GSE原花青素的组成(即不同聚合度的原花青素)成分进行分析,结果显示CBC中最主要的酚类活性物质为原花青素A2,其次为(表)儿茶素;而GSE中最主要的酚类活性物质为(表)儿茶素和原花青素B2。3、体内氧化还原状态调节与延缓衰老作用采用D-半乳糖致衰小鼠模型,以水溶性维生素E作为阳性对照,连续8周将15 mg/kg/d、30 mg/kg/d、60 mg/kg/d(剂量以总原花青素含量计)的CBC和GSE分别对受试小鼠进行灌胃。结果显示CBC和GSE可使肝脏丙二醛(MDA,以硫代巴比妥反应物TBARS的量表示)含量降低30%-57%,使大脑MDA含量降低24%-30%,使血浆8-异前列腺素含量降低11%-62%。同时CBC和GSE可使大脑的单胺氧化酶(MAO)活力降低27%-59%,使血浆MAO活力降低65%-71%。高剂量组(60 mg/kg/d)的CBC可使肝脏的GSH-Px水平显著提高42%(p<0.05),而中剂量组(30mg/kg/d)的GSE则使肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)水平提高了 13%(p<0.05)。以上结果表明,CBC和GSE均能通过调节体内氧化还原状态而延缓衰老。但是CBC对肝脏和血清中GSH-Px活性调节效果明显,而GSE对GSH-Px活性无调节作用,而两者对过氧化氢酶(CAT)的活性均无显著影响。4、基于端粒保护的延缓衰老作用采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组小鼠肝脏和睾丸的相对端粒长度(TL),发现低剂量组的CBC能显著抑制肝脏和睾丸中因D-半乳糖致衰而导致的端粒长度缩短(p<0.05),从而起到有效保护端粒的作用,但GSE却没有这方面的作用效果。采用蛋白质印迹法(WesternBlot)进行端粒酶逆转录酶基因tert和长寿基因sirt6表达水平的检测,发现中、高剂量组的CBC和低剂量组GSE均能显著降低睾丸中tert蛋白表达水平(p<0.05),但只有低剂量组的CBC能显著降低肝脏中的tert蛋白表达水平(p<0.05),提示CBC和GSE均可通过降低端粒酶活性从而预防细胞癌变的效果,但作用靶点不同;对于长寿基因sirt6,各剂量组的CBC和中剂量组的GSE均可显著提高长寿基因sirt6的蛋白表达水平(p<0.05)。由此可见,CBC和GSE均可靶向性地调控端粒酶逆转录酶基因terr的蛋白表达水平,促进长寿基因sirt6的蛋白表达,但只有CBC起到有效保护端粒的效果。