【摘 要】
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哺乳动物的受精是由一系列精卵质膜的相互作用而触发的,包括:精卵识别、精卵结合和精卵质膜融合。其中精卵质膜融合是受精过程最为关键的步骤,但其机制目前尚未明了。本研究运用
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哺乳动物的受精是由一系列精卵质膜的相互作用而触发的,包括:精卵识别、精卵结合和精卵质膜融合。其中精卵质膜融合是受精过程最为关键的步骤,但其机制目前尚未明了。本研究运用商业化抗ERp29 多克隆抗体和间接免疫荧光组织化学及蛋白免疫印迹技术,发现BALB/c小鼠附睾头部、尾部的精子及顶体反应后的精子中存在ERp29;ERp29 含量随精子在附睾运行过程显著增加,主要定位于附睾头部精子的头部前端,而在附睾尾部精子则主要定位于整个头部和尾部主段;精子发生顶体反应后,ERp29 又定位于精子头部的赤道部和顶体后区。在原核生物中成功克隆表达了小鼠重组ERp29,并经纯化后免疫家兔制备出相应的抗小鼠重组ERp29多克隆抗体。运用制备的抗体进行BALB/c小鼠穿卵实验,结果发现:该多克隆抗体能够显著抑制小鼠无透明带卵细胞的受精率和受精指数,且其抑制受精指数呈剂量依赖性。此外,检测了经抗体处理后的精子运动参数和顶体反应率,发现抗体对精子运动和顶体反应无明显影响。综上所述,ERp29存在于BALB/c小鼠精子中,其可能参与了BALB/c小鼠的精卵融合过程。
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