大丽花属是菊科中观赏价值较高的属之一。在园林绿化、鲜切花生产、新型能源和医药研究等方面应用广泛,具有较高的经济和社会价值。但多年栽培会致使病毒在大丽花体内逐年积累,导致病毒病蔓延、品质退化,大丽花产业因而易受到严重的冲击。本实验针对大丽花外植体灭菌、组培苗增殖、生根、定植,并比较不同品种间的增殖差异为主要研究内容,目的是探究出一套操作方便安全、能够高效且可重复验证的离体快繁技术,以便为大丽花资源的离体保存和快速繁殖提供技术支持,同时也为脱毒和遗传转化体系的建立奠定技术基础。1.使用0.1%HgC12、4%次氯酸钠、15%H202为灭菌药剂,比较在不同灭菌药剂、不同灭菌时间处理下,对大丽花’斗牛舞’品种不同外植体的污染率、褐化率和成活率的影响,以探讨适宜大丽花外植体的灭菌方法。2.以MS为基础培养基,探究了 6-BA和NAA不同浓度配比对大丽花’斗牛舞,品种不同外植体诱导再生和增殖的影响;并分别以MS、1/2MS与不同激素配比组合,比较不同激素配比对’斗牛舞’生根的影响;探究炼苗过程对组培苗定植成活率的影响,以及不同基质对组培苗定植成活率的影响。3.以’斗牛舞’、’克莱尔’、’金色飘雪’、’海利简’、’骑士’和’巴比伦,的组培苗为实验材料比较不同激素浓度配比对大丽花不同品种增殖系数的影响。实验结果如下:1.腋芽为外植体,以使用75%乙醇灭菌浸泡30s后,使用0.1%HgC12灭菌4min为适宜的灭菌方法,污染率在25%以下,最高成活率能够达到65%。叶片为外植体,以使用75%乙醇灭菌浸泡30s后使用0.1%HgC12灭菌3min的灭菌效果最好,污染率在25%以下,最终成活率可达为68%。2.叶片最适宜的诱导培养基是MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.8mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L,芽诱导率最高可以达到63%。’斗牛舞’适宜的增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L,增殖系数可达6.31。’斗牛舞’适宜的生根培养基是1/2MS+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L,30d后生根率达到87.4%,平均生根条数达2.7条。炼苗过程对定植成活率有很大的影响,未经过炼苗比经过炼苗的定植成活率低5%;较适宜的定植基质是:草炭+珍珠岩以1:3配比方式效果最好,成活率能够达到96%。3.’斗牛舞’、’克莱尔’达到最大增殖系数时的激素浓度配比相同,最佳的激素配比为6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L,增殖系数分别为6.31和5.88;’金色飘雪’、’海利简,达到最大增殖系数时的激素浓度配比相同,最佳的激素配比为6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,增殖系数分别为5.70和5.79;’骑士’和’巴比伦’达到最大增殖系数时的激素浓度配比相同,最佳激素配比为6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,增殖系数分别达5.99 和 5.41