1.横纹东方鲀肠道内产河豚毒素细菌的筛选 2.胜利油田原油组分的分析及石油降解菌的筛选

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河豚毒素(Tetrodotoxin TTX)又称原豚素(Spheroidine)、东方豚毒素(Fugu poison)等,是一种剧毒的生物碱类天然神经毒素,最初是从豚科鱼的卵巢和肝脏中提取得到的。TTX对钠通道具有阻断作用,它能够与肌肉、神经细胞膜上钠离子通道受体结合,抑制动作电位的传导。TTX除用作神经生理学、肌肉生理学的工具药外,还具有相当强的镇痛作用,并极有可能成为新的局部麻醉药和戒除药物依赖性的药物,而且具有不成瘾的特点,这就使TTX的具有广泛的应用前景。目前市场上的TTX主要从河豚鱼的卵巢和肝脏组织获得,如果能通过微生物发酵生产TTX,由于微生物生长迅速等特点,不仅可以满足市场的需求,而且对于保护河豚鱼免受因河豚毒素的开发而濒危灭绝有重要意义。TTX的起源目前一直存在争议,TTX最早在河豚体内被发现,并且人们已经注意到它有显著的个体、器官和组织差异性,在肝脏和卵巢中的含量最高,而人工养殖的河豚基本无毒。TTX不仅存在于河豚体内,在其他多种生物也发现了TTX或TTX类似物。这些含有TTX的生物有一个共同点,即其体内含有多种能分泌TTX及其类似物的细菌。近年来,已发现了多种能产生TTX的微生物,因此主张微生物起源假说的学者越来越多。本文以采集于我国福建海域的横纹东方鲀为研究对象,对其不同组织器官中的微生物进行了分离纯化,并对肠道内细菌进行了种属鉴定,对其发酵产物进行了处理,采用小鼠生物检测与柱后衍生高效液相色谱检测相结合的方法,检测发酵产物中是否含有TTX。结果表明:横纹东方鲀肠道内存在3株可以产生TTX的细菌,通过16S rDNA序列分析表明,HDC13为凝聚短状杆菌,HDC35为巨大芽孢杆菌),HDC37为速生嗜冷杆菌;通过混合培养后检测发现(HDC13+HDC35+HDC37)和(HDC35+HDC37)有较好的致死效果。总之,本文首次分离并鉴定了横纹东方鲀肠道内细菌,并对肠道内细菌产TTX的能力进行了研究,发现三株可以产TTX的细菌。为TTX的微生物起源奠定了基础,同时也为下一步TTX生物合成途径的研究提供了菌种资源。原油是存在于地下岩石孔隙中的以液态烃为主体的可燃有机矿产,原油又称石油。原油是一种极为复杂的混合物,其主要组成是烃类。包括链烷烃、烯烃、环烷烃和芳香烃,还含有微量的硫、氮化合物。不同油田生产的原油,因组成不同,往往具有不同的性质。不同性质的原油,要采用不同的加工方法,以生产适当的产品,使原油得到合理利用。因此原油组分的分析对原油的加工处理具有重要意义。随着海上溢油的频繁发生,溢油的鉴别变的尤为重要,而油指纹又是溢油鉴别的主要手段。此外,文献中已经报道多种石油降解菌,微生物降解石油具有操作简单,费用低和无二次污染等优点。因此,高效石油降解菌筛选就成为微生物降解石油的关键。本文首先采用气相色谱-质谱(GC-MS)的方法对胜利油田原油组分进行了定性分析,同时利用CPI(碳优势指数)、Cmax(主碳峰)、等值数进行了原油指纹信息的分析。通过组分定性分析,共定性了原油中的103种化合物,其中饱和链烷烃的质量分数为89.864%;通过指纹信息分析,确定了胜利油田原油的成熟度高(CPI=1.0267),母质类型好( ;原油沉积环境属于海相还原沉积环境( Pr/Ph <1)。其次,本文从石油污染的土壤中分离得到三株高效石油降解菌,经16s rDNA测序鉴定有两株属于不动杆菌属,一株属于芽孢杆菌属;三株菌均具有高效降解石油的能力,能够降解大部分石油烃。
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