植物作为地球生态系统的主要构成部分,与人类的生活息息相关,它不仅提供人类生命必需的物质(糖类、脂类和蛋白质等),还为人类提供大量的次生代谢物(secondary metabolites),而这些化合物除了参与调节植物自身的生长发育外,在植物保护和人类健康保健等领域同样发挥不可替代的作用。由人致病菌或者氧化应激引起的疾病给人类健康和社会经济带来了巨大压力,基于天然产物研究和开发抑菌剂和抗氧化剂无疑是可行而有效的途径,研究具有较强人致病菌抑制能力和抗氧化能力的天然产物对人类健康保健有巨大的实用价值。槌果藤(Capparis zlylanica Linn.,CZ),属于白菜花科槌果藤属植物,在我国有悠久的药用历史(如消炎,祛风止痛等),但目前与其相关的活性研究和药理研究报道较少。本论文研究了海南槌果藤对于植物病原菌和人致病菌的抑制活性,并对活性成分进行了追踪;并继续拓展其活性研究范围,对其体外自由基的清除活性进行了检测,此外还基于人源EA.hy926细胞和野生型酿酒酵母(wild type, WT)Saccharomyces cerevisiae BY4741 (MATa, his3, leu2, met15 和ura3)及其同源性基因缺陷型菌株Sod1,Ctt1, Gsh1,Gtt1和Gtt2评估了槌果藤大孔树脂提取物的体内抗氧化活性。研究结果如下:(1)体外自由基清除实验结果表明,槌果藤乙醇提取物对于DPPH自由基清除率的IC50在0.1-0.2mg/mL之间,清除效果低于对照的维生素C (VitaminC,VC)和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(butylated hydroxytoluene,BHT)。槌果藤样品浓度为0.1 mg/mL时对羟基自由基的清除率为37% (与0.1 mg/mL的BHT作用相似),远远高于同等浓度的VC溶液(16%)。由此可见,槌果藤样品溶液对于羟基自由基有较强的清除能力。然而,槌果藤样品在ABTS自由基清除和还原能力检测方面效果相对较差。(2)基于野生型酿酒酵母及其同源性基因缺陷型菌株评估了槌果藤提取物的体内抗氧化活性。经槌果藤大孔树脂吸附样品预处理后,WT型酵母细胞对于H2O2、CCl4和CdSO4三种氧化应激的耐受性明显提高。继续分析基因缺失型菌株发现槌果藤样品并不能明显地改善H2O2和CCl4胁迫下Gtt1型酵母以及CdSO4胁迫下Gtt2型酵母的耐受性,这说明GTT1基因有可能在槌果藤样品提高酿酒酵母细胞对H2O2和CCl4耐受性的机制中发挥重要作用,GTT2基因也可能是槌果藤样品减弱酵母细胞对镉毒性关键。脂质过氧化和细胞内ROS含量测定结果表明,槌果藤样品发挥抗氧化作用有可能是通过抑制酵母细胞膜脂质过氧化和降低细胞内ROS水平来发挥作用。同时,槌果藤样品能够降低人源EA.hy926细胞内ROS含量,进而保护细胞核并提高H202胁迫下细胞存活率。(3)通过渗漉法得到的槌果藤活性成分,经过植物病原菌抑菌试验测试,活性成分主要存在于氯仿萃取相中。石油醚相萃取物和正丁醇相萃取物对供试菌株的抑制率大部分低于5%,而氯仿相萃取物对于供试菌株的抑制率则在10%-30%之间,但仍然远远低于0.5 mg/mL的苯醚甲环唑和吡唑醚菌酯对于5种植物病原菌的抑制效果。氯仿相萃取物处理黄瓜枯萎菌、链格孢菌和葡萄溃疡菌2天后的抑制率分别是13.01%、18.77%和12.40%,而对于芒果炭疽菌和仙人掌平脐蠕孢(热带特有病原菌)处理2天后的抑制率分别达到23.51%和29.76%,抑制效果远远优于对于三种非热带特有菌。(4)通过滤纸片法检验槌果藤乙醇提取物对于3种常见的食源性致病细菌的抑制活性。结果表明槌果藤样品在低浓度(10mg/mL)时对于革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)无抑制作用,而对两种革兰氏阴性菌(大肠杆菌和铜绿假单胞菌)展现出一定的抑制效果(抑菌圈分别为9.7±1.1mm和9.3±0.41mm)。随着浓度的提高,槌果藤样品对于各株细菌均展现出了抑制活性,但是并不是呈完全的正相关关系;当浓度提高至200 mg/mL时,槌果藤样品对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抑菌圈分别达到15.4±2.5mm、20.6±2.7mm和21.2±0.9mm,低于相同浓度下对照样品山梨酸钾对于各株细菌的抑制作用。